| Processo: | 11/12156-0 |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Regular |
| Data de Início da vigência: | 01 de maio de 2012 |
| Data de Término da vigência: | 31 de dezembro de 2014 |
| Área do conhecimento: | Ciências da Saúde - Medicina |
| Pesquisador responsável: | Ricardo Sobhie Diaz |
| Beneficiário: | Ricardo Sobhie Diaz |
| Instituição Sede: | Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil |
| Município da Instituição Sede: | São Paulo |
| Assunto(s): | Infectologia Retroviridae HIV-1 Farmacorresistência viral Antirretrovirais Linfócitos T CD4-positivos Carga viral Análise de sequência de DNA |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Aids | Bottleneck genético | Hiv | Quasispécies | Resistência transmitida | Sequenciamento paralelo maciço | Infectolologia |
Resumo
A baixa diversidade genética do HIV-1 em pacientes com diagnóstico de infecção viral recente é consequência de restrição genética (bottleneck) durante a transmissão do vírus. Entretanto, alguns estudos demonstraram, por sequenciamento convencional, que a ocorrência desse fenômeno é menos frequente em pacientes do gênero feminino, sugerindo maior susceptibilidade de mulheres à infecção inicial por múltiplas variantes virais. Hipoteticamente, mulheres portadoras do HIV-1 poderiam apresentar um maior risco de infecção por variantes do vírus resistentes aos medicamentos antirretrovirais. A presença de resistência transmitida aos antirretrovirais apresenta reflexos importantes no sucesso da terapia antirretroviral e, consequentemente, na progressão para a aids. Entretanto, as técnicas convencionais de sequenciamento são incapazes de detectar essas variantes resistentes do HIV-1 que tenham frequência inferior a 20% na quasispecie viral. O presente estudo visa conferir a hipótese de ausência de bottleneck genético em mulheres durante a transmissão do HIV-1 utilizando sequenciamento paralelo maciço. E ainda, estimar a prevalência de resistência transmitida aos antirretrovirais em pacientes recém-infectados pelo HIV-1, utilizando-se dessa técnica mais sensível de sequenciamento. Serão avaliados 20 pacientes do gênero feminino e 20 pacientes do gênero masculino virgens de tratamento antirretroviral e diagnosticados com infecção recente pelo HIV-1, pareados para idade, contagem de linfócitos T CD4+ e carga viral do HIV-1. Amostras de sangue estocadas serão submetidas à extração do RNA viral e DNA proviral e as regiões codificadoras de env e pol amplificadas por nested-PCR. Em seguida, os produtos de PCR serão submetidos ao sequenciamento paralelo maciço e as sequências geradas analisadas filogeneticamente. (AU)
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