Investigação do efeito do TAK-778 na interação osteoblasto-osteoclasto

• Processo: 06/03402-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2006
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2009
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia
• Pesquisador responsável: Adalberto Luiz Rosa
• Beneficiário: Adalberto Luiz Rosa
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Medula óssea Osteogênese Citocinas Osteoclastos Osteoblastos Expressão gênica Reabsorção óssea
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biologia Ossea | Cultura De Celulas | Medula Ossea | Osteoblastos | Osteoclastos | Tak 778 | Biologia óssea

Resumo

O TAK-778 é um composto capaz de estimular a osteogênese in vitro e in vivo. Células da linhagem osteoblástica sintetizam e secretam citocinas que agem por meio de mecanismos parácrinos no controle da osteoclastogênese. Entretanto, até o presente momento, nenhum estudo foi realizado para avaliar o efeito do TAK-778 na formação e ativação de osteoclastos. Portanto, o objetivo do presente estudo será investigar o efeito do TAK-778 em osteoclastos e na interação entre osteoblastos e osteoclastos. Células precursoras de osteoclastos, obtidas de medula óssea humana, serão cultivadas em presença de veículo (controle) e TAK-778 (10-SM). Para avaliar o efeito do TAK-778 na interação osteoblasto/osteoclasto, osteoclastos serão cultivados em meio de cultura condicionada por osteoblastos, cultivados em presença de veículo (controle) e TAK-778(10-SM). Ao final de 7 dias em cultura, serão avaliados os seguintes parâmetros: 1) Expressão dos genes RANKL, OPG, IL-1, IL-6, IL-11e TNF-alpha, em osteoblastos humanos, por meio da técnica de real time PCR; 2) Conteúdo das citocinas RANKL, OPG, IL-1, IL-6, IL-ll e TNF-alpha e, de prostaglandina PGE2, em osteoblastos humanos, por meio da técnica de ELISA; 3) Formação e ativação osteoclástica, por meio de coloração para fosfatase ácida (TRAP) e ensaio de reabsorção óssea. Os experimentos serão realizados em triplicata e os dados serão submetidos à análise de variância (ANOVA) seguida do teste de Bonferroni ou ao teste t, quando apropriado. (AU)