Caracterização molecular e estrutural do Leishmania RNA vírus LRV1-4

• Processo: 13/17791-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2014
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2017
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Otavio Henrique Thiemann
• Beneficiário: Otavio Henrique Thiemann
• Instituição Sede: Instituto de Física de São Carlos (IFSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Virologia molecular Totiviridae Leishmaniavirus Interações hospedeiro-patógeno Capsídeo Microscopia crioeletrônica Microscopia eletrônica de varredura Cristalografia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Crio-microscopia eletrônica | Cristalografia | Leishmania sp | Leishmaniavirus | Totiviridae | Virologia estrutral

Resumo

Além do inegável impacto em saúde humana e de animais domésticos, o estudo dos protozoários (Reino Protista) é de grande relevância pela diversidade de espécies, muitas ainda desconhecidas, e sua importância evolutiva no surgimento de eucariotos. Desta forma, o estudo de diversos aspectos da biologia de protozoários, parasitas ou não, se justifica. O Leishmania RNA vírus 1-4 (LRV1-4) é um vírus classificado como pertencente a família Totiviridae. Possui capsídeo icosaédrico de genoma composto por RNA de dupla fita (dsRNA) que codifica duas proteínas, uma capsidial e uma RNA polimerase. Sendo pouco estudado, mas com indicação de ter relevancia na invasão celular de Leishmania, iniciamos a caracterização molecular deste vírus com o objetivo de empreender estudos estruturais e funcionais. Dados recentes indicam o envolvimento do LRV1-4 na patogênese de Leishmania no hospedeiro humano, tornando seu estudo de fundamental importância para o entendimento dessa doença e de seu papel na relação parasito-hospedeiro. Trabalhos recentes desenvolvidos por nosso laboratório resultaram no estabelecimento de uma metodologia de purificação de partículas de LRV1-4 com o qual obtivemos imagens inéditas de Microscopia Eletrônica de Varredura do capsideo. Na presente proposta, com base nos procedimentos já estabelecidos, daremos continuidade aos estudos de Microscopia Eletrônica de Varredura por Negative Staining e Crio-Microscopia Eletrônica, caracterização molecular e estrutural do capsideo viral extraído de células infectadas de Leishmania guyanensis e de caspideos recombinantes expressos em Leishmania tarentolae. Os estudos aqui propostos deverão permitir a construção de um modelo estrutural do capsídeo do LRV1-4 e contribuir no entendimento do processo de replicação, a confirmação (ou não) dentre os Totiviridae e o seu papel na relação parasito-hospedeiro. Além das contribuições ao conhecimento da biologia/patogenia do LRV1-4 este estudo representa a primeira caracterização estrutural de um capsideo viral realizada no Brasil e assim um avanço importante para a área de virologia e biologia estrutural no pais. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BALASCO SERRAO, VITOR HUGO; SILVA, IVAN ROSA; ALVES DA SILVA, MARCO TULIO; SCORTECCI, JSSICA FERNANDES; FERNANDES, ADRIANO DE FREITAS; THIEMANN, OTAVIO HENRIQUE. The unique tRNA(Sec) and its role in selenocysteine biosynthesis. Amino Acids, v. 50, n. 9, p. 1145-1167, SEP 2018. (11/24017-4, 16/20977-7, 13/17791-0, 12/23730-1, 10/04429-3)

SCORTECCI, JESSICA F.; SERRAO, VITOR HUGO B.; FERNANDES, ADRIANO F.; BASSO, LUIS G. M.; GUTIERREZ, RAISSA F.; ARAUJO, ANA PAULA U.; NETO, MARIO O.; THIEMANN, OTAVIO H.. Initial steps in selenocysteine biosynthesis: The interaction between selenocysteine lyase and selenophosphate synthetase. International Journal of Biological Macromolecules, v. 156, p. 18-26, AUG 1 2020. (12/23730-1, 16/20977-7, 14/00206-0, 13/17791-0, 14/16005-4)

BALASCO SERRAO, VITOR HUGO; DE FREITAS FERNANDES, ADRIANO; MANSOR BASSO, LUIS GUILHERME; SCORTECCI, JESSICA FERNANDES; CRUSCA JUNIOR, EDSON; LOPES CORNELIO, MARINONIO; MONSON DE SOUZA, BIBIANA; PALMA, MARIO SERGIO; DE OLIVEIRA NETO, MARIO; THIEMANN, OTAVIO HENRIQUE. The Specific Elongation Factor to Selenocysteine Incorporation in Escherichia coli: Unique tRNA(Sec) Recognition and its Interactions. Journal of Molecular Biology, v. 433, n. 23, NOV 19 2021. (13/17791-0, 14/00206-0, 12/15777-8, 12/23730-1, 14/16005-4, 98/14138-2)