Toxicologia do fluoreto: estudos proteômicos em intestino e fígado

• Processo: 12/16840-5
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2014
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2016
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Odontologia Social e Preventiva
• Pesquisador responsável: Marília Afonso Rabelo Buzalaf
• Beneficiário: Marília Afonso Rabelo Buzalaf
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brasil
• Auxílio(s) vinculado(s): 14/50798-1 - Fluoride (F) metabolism/body F retention: effects of host (genetic variation) and environment (F dose and exercise) factors, AP.R SPRINT
• Assunto(s): Toxicologia Fluoretos Trato gastrointestinal Fígado Intestinos Bioquímica Proteômica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Analise Proteômica | Exposição Aguda | Exposição crônica | fígado | Fluoreto | Sistema Nervoso Entérico | Bioquímica

Resumo

O trato gastrointestinal é a principal rota de exposição ao fluoreto (F), sendo este íon rapidamente absorvido a partir dele. A complexa coordenação da função intestinal é realizada por redes neuronais autonômicas interligadas e incorporadas às suas paredes, sendo este conjunto denominado Sistema Nervoso Entérico (SNE). Embora os efeitos neurotóxicos do F sobre o SNC sejam bastante descritos, não existem estudos relacionados com a neurotoxicidade do F sobre o SNE. Em trabalho prévio realizado pelo nosso grupo foi observado que o F pode provocar alterações na expressão de várias proteínas hepáticas. Em adição, há relatos na literatura sugerindo que as alterações causadas por este íon no organismo são dose e tempo-dependentes. O presente projeto será desenvolvido na forma de dois subprojetos cujos objetivos são: (1) avaliar o efeito da exposição a dose aguda ou crônica de F sobre a população geral de neurônios entéricos e também sobre as subpopulações que expressam os seus principais neurotransmissores, a saber: Óxido Nítrico (NO), Peptídeo Vasoativo Intestinal (VIP), Acetilcolina (ACh), Peptídeo Relacionado ao Gene da Calcitonina (CGRP) e Substância P (SP), bem como estabelecer o perfil proteômico diferencial no intestino dos diferentes grupos de tratamento; (2) analisar alterações em fígado de ratos submetidos à intoxicação crônica por F em diferentes tempos e doses, utilizando análises proteômicas e histológicas como ferramentas. No subprojeto 1, os animais serão divididos em 5 grupos, que receberão as doses crônicas de 0, 5 ou 50 mgF/L(por 30 dias), enquanto a dose aguda será de 0 ou 100 mgF/Kg (gavagem gástrica). Ao final de cada tratamento, os ratos serão eutanasiados para a realização dos experimentos imunohistoquímicos do plexo mioentérico do intestino delgado, especialmente de 3 segmentos (duodeno, jejuno e íleo). Posteriormente, será realizada a análise proteômica como um meio de melhor explorar e integrar os fenômenos encontrados sobre os segmentos e populações neuronais mais afetadas pelo F. No subprojeto 2, os animais serão divididos em 2 grupos, de acordo com o tempo de tratamento (20 dias, grupo A, ou 60 dias, grupo B). Cada grupo será dividido em 3 subgrupos, de acordo com a dose de F a ser administrada através da água de beber, a saber: 0 (controle- subgrupos A1 e B1), 15 (subgrupos A2 e B2) ou 50 mg/L (subgrupos A3 e B3). Ao final do tratamento os animais serão eutanasiados e os fígados submetidos a análises de F, histológica e proteômica. (AU)

Publicações científicas

(6)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BARBOSA DA SILVA PEREIRA, HELOISA APARECIDA; DIONIZIO, ALINE SALGADO; ARAUJO, TAMARA TEODORO; FERNANDES, MILENI DA SILVA; IANO, FLAVIA GODOY; RABELO BUZALAF, MARILIA AFONSO. Proposed mechanism for understanding the dose-and time-dependency of the effects of fluoride in the liver. Toxicology and Applied Pharmacology, v. 358, p. 68-75, NOV 1 2018. (11/17263-9, 12/16840-5)

DIONIZIO, ALINE SALGADO; SOUZA MELO, CARINA GUIMARAES; SABINO-ARIAS, ISABELA TOMAZINI; SILVA VENTURA, TALITA MENDES; LEITE, ALINE LIMA; GARCIA SOUZA, SARA RAQUEL; SANTOS, ERIKA XAVIER; HEUBEL, ALESSANDRO DOMINGUES; SOUZA, JULIANA GADELHA; COLOMBO MARTINS PERLES, JULIANA VANESSA; et al. Chronic treatment with fluoride affects the jejunum: insights from proteomics and enteric innervation analysis. SCIENTIFIC REPORTS, v. 8, FEB 16 2018. (16/09100-6, 11/10233-7, 12/16840-5)

DE SOUZA MELO, CARINA GUIMARAES; ZANONI, JACQUELINE NELISIS; GARCIA DE SOUZA, SARA RAQUEL; ZIGNANI, ISABELA; LEITE, ALINE DE LIMA; HEUBEL, ALESSANDRO DOMINGUES; COLOMBO MARTINS PERLES, JULIANA VANESSA; RABELO BUZALAF, MARILIA AFONSO. Global Proteomic Profile Integrated to Quantitative and Morphometric Assessment of Enteric Neurons: Investigation of the Mechanisms Involved in the Toxicity Induced by Acute Fluoride Exposure in the Duodenum. NEUROTOXICITY RESEARCH, v. 39, n. 3, MAR 2021. (12/16840-5, 11/10233-7)

DIONIZIO, ALINE; UYGHURTURK, DAWUD ABDUWELI; SOUZA MELO, CARINA GUIMARAES; SABINO-ARIAS, ISABELA TOMAZINI; ARAUJO, TAMARA TEODORO; SILVA VENTURA, TALITA MENDES; COLOMBO MARTINS PERLES, JULIANA VANESSA; ZANONI, JACQUELINE NELISIS; DEN BESTEN, PAMELA; RABELO BUZALAF, MARILIA AFONSO. Intestinal changes associated with fluoride exposure in rats: Integrative morphological, proteomic and microbiome analyses. Chemosphere, v. 273, JUN 2021. (11/10233-7, 16/09100-6, 12/16840-5)

DIONIZIO, ALINE; MELO, CARINA GUIMARAES SOUZA; SABINO-ARIAS, ISABELA TOMAZINI; ARAUJO, TAMARA TEODORO; VENTURA, TALITA MENDES OLIVEIRA; LEITE, ALINE LIMA; SOUZA, SARA RAQUEL GARCIA; SANTOS, ERIKA XAVIER; HEUBEL, ALESSANDRO DOMINGUES; SOUZA, JULIANA GADELHA; et al. Effects of acute fluoride exposure on the jejunum and ileum of rats: Insights from proteomic and enteric innervation analysis. Science of The Total Environment, v. 741, NOV 1 2020. (11/10233-7, 16/09100-6, 12/16840-5)

DE SOUZA MELO, CARINA GUIMARAES; COLOMBO MARTINS PERLES, JULIANA VANESSA; ZANONI, JACQUELINE NELISIS; GARCIA DE SOUZA, SARA RAQUEL; SANTOS, ERIKA XAVIER; LEITE, ALINE DE LIMA; HEUBEL, ALESSANDRO DOMINGUES; OLIVEIRA E SOUZA, CAMILA; DE SOUZA, JULIANA GADELHA; RABELO BUZALAF, MARILIA AFONSO. Enteric innervation combined with proteomics for the evaluation of the effects of chronic fluoride exposure on the duodenum of rats. SCIENTIFIC REPORTS, v. 7, APR 21 2017. (11/10233-7, 12/16840-5)