O estresse oxidativo altera o padrão de fatores de transcrição relacionados ao desenvolvimento inicial de embriões produzidos in vitro Oxidative Stress Alters The Profile Of Transcription Factors Related To Early Development On In Vitro Produced Embryos

• Processo: 17/19865-2
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Publicações científicas - Artigo
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2017
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2018
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Marcella Pecora Milazzotto
• Beneficiário: Marcella Pecora Milazzotto
• Instituição Sede: Centro de Ciências Naturais e Humanas (CCNH). Universidade Federal do ABC (UFABC). Ministério da Educação (Brasil). Santo André , SP, Brasil
• Assunto(s): Respiração celular Estresse oxidativo Fatores de transcrição Embrião
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: embrião | Estresse oxidativo | fatores de transcrição | metabolismo oxidativo

Resumo

Altos níveis de oxigênio durante a CIV pode induzir estresse oxidativo através do acúmulo de espécies reativas de oxigênio (ROS), afetando negativamente o desenvolvimento embrionário inicial, causando mudanças na expressão de genes, fragmentação de DNA, aumentando apoptose, entre outros fatores. Este estudo avaliou o efeito de diferentes tensões de O2 durante a CIV no desenvolvimento de blastocistos bovinos e status transcricional, considerando principalmente fatores de transcrição que tem papel essencial durante o desenvolvimento inicial. Para isso, embriões bovinos foram produzidos in vitro por técnicas convencionais e cultivados em duas tensões de O2, fisiológica (5%) e atmosférica (20%). Blastocistos expandidos foram submetidos a quantificação de transcripts por RT-qPCR com o sistema Biomark HD (Fluidigm, US), usando 67 ensaios TaqMan específicos para Bos taurus. Não houve diferença nas taxas de clivagem, mas a taxa de blastocisto foi maior no grupo 5% O2. Houve diferença na quantificação de genes relacionados aos processos de oxido-redução, fatores de transcrição DNA dependentes, e fatores relacionados a importantes vias funcionais para o desenvolvimento embrionário, como diferenciação celular, proliferação e apoptose. Para verificar estes dois últimos efeitos, blastocisto foram corados diferencialmente e o numero de células foi obtido. O grupo 5 O2 apresentou maior numero de células totais, TE e MCI. A concentração de ROS foi avaliada por DCF, com maior presença de ROS em embriões cultivados a 20 de O2. Estes dados nos permitem concluir que o cultivo de embriões PIV na tensão de O2 atmosférica afeta a expressão de importantes fatores de transcrição envolvidos em múltiplas vias celulares e pode afetar o desenvolvimento, qualidade e viabilidade embrionários. (AU)