Criacao de uma biblioteca de insercao aleatoria da construcao contendo o gene codificador da proteina fluorescente verde (gfp) no genoma de fibroblastos fetais bovinos e possivel metodo para o estabelecimento..

• Processo: 06/51516-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2006
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Flávio Vieira Meirelles
• Beneficiário: Fabiana Fernandes Bressan
• Instituição Sede: Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos (FZEA). Universidade de São Paulo (USP). Pirassununga , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 03/10167-8 - Desenvolvimento e capacitação técnica na produção de bovinos transgênicos por recombinação homóloga, AP.PRNX.TEM
• Assunto(s): Biblioteca gênica Transgenia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Auto-Sexagem Embrionaria | Biblioteca Genica | Proteina Fluorescente Verde | Transferencia De Nucleo | Transgenia

Resumo

Diversas técnicas genômicas vêm sendo aplicadas com o objetivo de seqüenciar e caracterizar a função dos diversos genes e regiões desconhecidas do genoma. Via de regra estes estudos finalizam por sugerir funções a determinados genes e outras regiões específicas. Entretanto, para que um mecanismo de função de um gene seja estabelecido há necessidade de que sejam estabelecidos modelos de estudos que freqüentemente utilizam experimentos envolvendo animais geneticamente modificados, como por exemplo os animais knock out. A proposta de trabalho deste projeto é estudar a viabilidade de estabelecimento de linhagens celulares de fibroblastos fetais bovinos provenientes de um bovino macho que receberam uma construção portando o gene da proteína fluorescente verde, freqüentemente utilizada como gene repórter, em regiões aleatórias do genoma e caracterizar as linhagens quanto a localização do inserto por FISH (hibridização in situ fluorescente). Finalmente, o estudo visa em especial à busca de células que receberam a construção em cromossomos sexuais (X ou Y) no intuito de gerar, mediante utilização da célula como doadora de núcleo, um animal que produza gametas segregando o gene GFP e, portanto, gere após fecundação in vitro ou produção de embriões por transferência nuclear blastócitos auto-sexáveis (onde embriões de somente um dos sexos serão transgênicos e emitirão fluorescência quando devidamente analisados). (AU)