(na+,k+)-atpase branquial e a osmorregulacao em crustaceos: efeito da salinidade na expressao e caracteristicas cineticas da enzima de callinectes ornatus ordway, 1863 (crustacea, portunidade).

• Processo: 06/56759-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2007
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Francisco de Assis Leone
• Beneficiário: Daniela Pereira Garçon
• Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Isoformas de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Callinectes Ornatus | Excrecao De Amonia | Expressao De Rna | Isoformas | Na,K-Atpase | Tecido Branquial

Resumo

O presente projeto tem como objetivo o estudo sistemático e comparativo das propriedades estruturais e cinéticas da (Na+,K+)-ATPase do tecido branquial de Callinectes ornatus capturado no seu habitat natural bem como aclimatado a uma salinidade de até 21%o. Para isso, serão realizados os seguintes estudos:1) preparação da (Na+,K+)-ATPase do tecido branquial de animais mantidos a salinidade de 21 %o e de animais recém capturados. 2) caracterização cinética da atividade da enzima em relação aos ligantes ATP, Na+, K+, Mg+ e (NH4)+. 3) determinação da abundância relativa da enzima através de técnicas de imunohistoquímica. 4) caracterização da fosfoenzima em relação aos diferentes ligantes. 5) determinação da ultra-estrutura das brânquias. 6) estudo do efeito de poliaminas na atividade da enzima. 7) determinação da seqüência do mRNA da subunidade alfa. 8) inibição pela ouabaína. 9) comparação da seqüência encontrada para o animal recém capturado com a dos aclimatados e verificação de diferenças na expressão de isoformas durante a aclimatação. (AU)