Ação do inibidor recombinante de Bauhinia rufa sobre a linhagem celular de câncer de próstata: estudos comparativos com inibidores isola dos do mesmo gênero

• Processo: 06/59510-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2007
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Maria Luiza Vilela Oliva
• Beneficiário: Paula Malloy Mota Diniz
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 03/10516-2 - Aspectos estruturais e funcionais de proteinases e inibidores: clonagem, modificação estrutural, inflamação, hemostasia, biologia celular e desenvolvimento de insetos, AP.PRNX.TEM
• Assunto(s): Clonagem Inibidores Expressão heteróloga Bauhinia Peptídeo hidrolases Proliferação celular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bauhinia | Clonagem | Expressao Heterologa | Inibidores | Proliferacao Celular | Proteases

Resumo

Este projeto visa à clonagem do gene que codifica um inibidor de tripsina (BrTI) de sementes de B. rufa, já caracterizado com relação à sua estrutura primária. Esta mostra homologia com inibidores vegetais da família do tipo Kunitz, entretanto, o BrTI não contém nenhum resíduo Cys e apresenta a seqüência RGD na região N-terminal da molécula. Esta peculiaridade estrutural despertou-nos muito interesse, pois não foi encontrada em nenhum outro inibidor. O tripeptídeo RGD é a seqüência sinal que receptores como as integrinas reconhecem. As integrinas participam em vários eventos bioquímicos, como a adesão, a migração e a diferenciação celulares, a apoptose, a agregação plaquetária, a inflamação e o câncer. A clonagem do gene codificante para BrTI e conseqüente expressão heterologa disponibilizará grandes quantidades desse inibidor, permitindo sua caracterização em eventos bioquímicos cuja interação com receptores é de grande interesse farmacológico, tais como a inflamação e tumorogenese e poderá auxiliar no desenvolvimento de drogas como tratamento alternativo para a redução dos processos patológicos. Após a clonagem do gene para BrTI este será inserido num vetor de adequado para expressão visando à produção heterologa deste inibidor em E. coli. A princípio será ensaiada a expressão num sistema pET (Novagen), acrescentando apenas uma metionina iniciadora no produto da expressão. (AU)