Caracterizacao da proteina larbp38: mapeamento do dominio de interacao com acidos nucleicos e identificacao de possiveis proteinas parceiras.

• Processo: 07/50620-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2007
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Maria Isabel Nogueira Cano
• Beneficiário: Arina Marina Perez
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Leishmania mexicana Telômero
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Leishmania Amazonensis | Mutantes Delecionais | Rbp38 | Telomeros

Resumo

O presente trabalho tem por objetivo mapear os domínios de interação da proteína LaRbp38 de Leishmania amazonensis com ácidos nucléicos e a identificação de proteínas parceiras que formem possíveis complexos com ela nos telômeros do parasita LaRbp38 é uma proteína exclusiva de protozoários tripanosomatídeos, codificada por um gene nuclear, que parece exercer diferentes funções nas maquinarias de replicação nuclear e mitocondrial. A análise estrutural da proteína não indica a presença de nenhum domínio canônico de interação a ácidos nucléicos. Para dar inicio aos experimentos, serão desenhados mutantes delecionais da proteína de L. amazonensis (LaRbp38) de forma que cada um represente uma sobreposição do outro. Cada mutante será subclonado em vetor de expressão bacteriano para produção de polipeptídeos recombinantes. Em seguida os polipeptídios purificados serão testados em ensaios in vitro de interação proteína-DNA (EMSA) usando DNA telomérico e DNA e RNA mitocondriais como ligantes. O intuito é o de se descobrir quais destes mutantes contém domínio(s) de interação com ácidos nucléicos. Sabendo-se que a proteína LaRbp38 interage in vitro com diferentes alvos, serão realizados ensaios de imunoprecipitação utilizando-se anticorpo específico e extratos totais do parasita, da mesma forma, serão realizadas análises de co-localização subcelular da proteína LaRbp38 e suas parceiras por imunofluorescência indireta. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

PEREZ, Arina Marina. Caracterização da proteina LaRbp38: mapeamento do domínio de interação com ácidos nucléicos e identificação de possíveis proteínas parceiras. 2009. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Instituto de Biociências. Botucatu Botucatu.