Avaliação das características de células planctônicas e de biofilme formados a partir de diferentes genótipos de Streptococcus mutans prevalentes em biofilme cariogênico formado in situ

• Processo: 05/03089-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2006
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2010
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia
• Pesquisador responsável: Cinthia Pereira Machado Tabchoury
• Beneficiário: Rodrigo Alex Arthur
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
• Assunto(s): Genótipo Cariologia Polissacarídeos Expressão gênica Streptococcus mutans
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Atividade De Atpase | Biofilme In Vitro | Expressao Genica | Genotipos | Polissacarideos | Streptococcus Mutans | Cariologia

Resumo

Resultados preliminares (Arthur et al., 2005) demonstram seleção de genótipos de Streptococcus mutans no biofilme dental formado in situ sob alto desafio cariogênico. Nessas condições de estresse, os S. mutans desenvolvem mecanismos de proteção, como o aumento na atividade da bomba translocadora de prótons (F-ATPase) e alteração na composição lipídica da membrana celular. Dessa forma, o objetivo do presente trabalho será avaliar a viabilidade celular, a atividade F-ATPase e a composição lipídica de membrana dos genótipos de campo de S. mutans (Arthur et al., 2005), através de ensaios de células planctônicas e em biofilme in vitro, no qual será também determinado o pH glicolítico, os polissacarídeos intra e extracelulares e a expressão do gene atpD. Para isso, os genótipos de S. mutans mais prevalentes no biofilme dental formado in situ e in vivo sob alto e baixo desafio cariogênico (Arthur et al., 2005) serão reativados em pH 7,0. As culturas serão centrifugadas e ressuspendidas em tampão pH 5,0 ou 2,8 e após 30, 60 e 90 minutos será determinada a viabilidade celular. Nessa ocasião, alíquotas serão coletadas para determinação da composição lipídica de membrana e da atividade ATPase. Para o biofilme formado in vitro, serão utilizados os mesmos genótipos do ensaio anterior, inoculados em meio com 1% de sacarose, contendo lâminas de vidro, por 5 dias. Ao biofilme será acrescido glicose 1% e a queda de pH será monitorada. Parte do biofilme será coletado e submetido às mesmas análises descritas para o ensaio anterior, e a outra parte será utilizada para determinar as concentrações de polissacarídeos extracelulares solúveis e insolúveis, e intracelulares presentes nesse biofilme, bem como a expressão do gene atpD.

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

ARTHUR, Rodrigo Alex. Avaliação de caracteristicas fenotipicas de cariogenicidade de genotipos de Strptococcus Mutans isolados de biofilme dental. 2010. Tese de Doutorado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba Piracicaba, SP.