Caracterizacao funcional e estrutural de uma fosfolipase a2 acida toxica isdolada do veneno de bothrops moojeni.

• Processo: 07/02022-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2007
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Toxicologia
• Pesquisador responsável: Andreimar Martins Soares
• Beneficiário: Norival Alves Santos Filho
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Venenos de serpentes DNA complementar Bothrops moojeni Modificação química
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bothrops moojeni | Caracterização Funcional e Estrutural | cDNA | Fosfolipase A2 Ácida Miotóxica | modificação química | venenos de serpentes | Bioquímica Farmacológica

Resumo

Fosfolipases A2 (PLA2s; E.C.3.1.1.4) são enzimas, que catalisam especificamente a hidrólise de fosfolipídios na ligação éster do carbono 2, liberando lisofosfolipídios e ácidos graxos, em uma reação dependente de cálcio. Essas enzimas possuem uma grande variedade de efeitos farmacológicos e/ou tóxicos, como mionecrótico, anticoagulante, inibição de agregação plaquetária, neurotoxicidade, hipotensão arterial e indução de edema. O presente trabalho tem como objetivo a caracterização estrutural e funcional de uma fosfolipase A2 ácida tóxica isolada do veneno de Bothrops moojeni. O isolamento dessa enzima será realizado em três etapas cromatográficas (troca iônica, exclusão molecular e hidrofobicidade). A caracterização bioquímica dessa enzima será determinada por testes como a determinação do peso molecular e ponto isoelétrico. A caracterização enzimática se dará por meio da atividade fosfolipásica dose-dependente e efeitos da temperatura e pH sobre essa atividade. Outra atividade prevista será a modificação química de His-48 com BPB e o efeito de íons metálicos divalentes e EDTA sobre a atividade dessa enzima. A caracterização funcional será feita através das atividades anticoagulante, miotóxica, indução de edema e letalidade. Logo em seguida será realizada a caracterização estrutural dessa enzima, através da clonagem e seqüenciamento de cDNA, além da análise da sua estrutura primária (Clustal e Phylip). As fosfolipases A2 ácidas tóxicas possuem mecanismos de ação ainda não totalmente esclarecidos, e apresentam atividades farmacológicas que poderiam ser melhor estudadas e exploradas para futuras aplicações clínicas.

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

SANTOS FILHO, Norival Alves. Caracterização funcional e estrutural de uma fosfolipase A2 ácida tóxica isolada da peçonha de Bothrops moojeni. 2009. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (PCARP/BC) Ribeirão Preto.