Estudos bioquimicos e estruturais de inibidores de serinoproteases purificados de ovos do inseto triatoma infestans.

• Processo: 05/03339-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2006
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Aparecida Sadae Tanaka
• Beneficiário: Renato de Marco
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Inibidores de proteases Triatoma infestans
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Fenoloxidase | Inibidores De Proteases | Pacifastina | Triatoma Infestans | Inibidores de proteases

Resumo

Os inibidores de serinoproteases representam uma classe de moléculas produzidas por hematófagos que merecem destaque, visto a necessidade do controle de inúmeras serinoproteases presentes nos invertebrados. Em animais hematófagos invertebrados alguns inibidores com função conhecida já foram descritos, tais como os anticoagulantes: hirudina, TAP (Tick Anticoagulant Peptide), ornitodorina, dipetalogastina, infestina 1-2, infestina 3-4, dentre outros. No entanto, muitos outros inibidores de serinoproteases presentes em animais invertebrados não apresentam papel fisiológico conhecido como: FPI-F (inibidor de protease de fungo de B. mori), LMCI-1 (inibidor de quimotripsina de Locusta migratoria), SGPI-1 (inibidor de protease de Schistocerca gregaria), RsTIs (inibidores de tripsina de carrapato R. sanguineus), BmTIs (inibidores de tripsina de carrapato Boophilus microplus), infestina 1R (inibidor de elastase de T. infestans). Recentemente, o nosso grupo purificou e caracterizou dois inibidores de proteases presentes em ovos de T infestans que apresentaram a mesma seqüência de aminoácidos em sua região N-terminal. Estes resultados permitiram classificar estes inibidores como membros da família Pacifastina, sendo os primeiros membros ao nível de proteína a serem descritos em animais hematófagos. Inibidores de proteases de T. infestans tem sido objeto de investigação em nosso grupo há alguns anos e no presente projeto temos como objetivo geral estudar os inibidores de proteases presentes em ovos de T. infestans. Para tal, pretendemos: 1. Clonar o gene que codifica o inibidor. 2. Determinar em quais tecidos este inibidor é expresso e quantificar a sua expressão gênica por PCR em tempo real. 3. Avaliar o papel deste inibidor na cascata da pro-fenoloxidase e seu potencial como antimicrobiano.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DE MARCO, RENATO; AZZOLINI, SIMONE S.; LOVATO, DIOGO V.; TORQUATO, RICARDO J. S.; AMINO, ROGERIO; DE MIRANDA, ANTONIO; TANAKA, APARECIDA S.. Validation of a Phage Display Method for Protease Inhibitor Selection Using SFTI and HiTI Synthetic Hybrid Peptides. COMBINATORIAL CHEMISTRY & HIGH THROUGHPUT SCREENING, v. 13, n. 9, p. 829-835, NOV 2010. (02/13960-8, 05/03514-9, 05/03339-2)

CLARA, RENAN O.; SOARES, TATIANE S.; TORQUATO, RICARDO J. S.; LIMA, CASSIA A.; WATANABE, RENATA O. M.; BARROS, NILANA M. T.; CARMONA, ADRIANA K.; MASUDA, AOI; VAZ JUNIOR, ITABAJARA S.; TANAKA, APARECIDA S.. Boophilus microplus cathepsin L-like (BmCL1) cysteine protease: Specificity study using a peptide phage display library. Veterinary Parasitology, v. 181, n. 2-4, p. 291-300, SEP 27 2011. (09/50434-1, 05/03514-9, 05/03339-2)

DE MARCO, RENATO; LOVATO, DIOGO V.; TORQUATO, RICARDO J. S.; CLARA, RENAN O.; BUARQUE, DIEGO S.; TANAKA, APARECIDA S.. The first pacifastin elastase inhibitor characterized from a blood sucking animal. Peptides, v. 31, n. 7, p. 1280-1286, JUL 2010. (02/13960-8, 09/50434-1, 05/03514-9, 05/03339-2)