Caracterizacao do gene cdc2/cdk10 putativo e analise de sua possivel atuacao nos endociclos de rhynchosciara americana.

• Processo: 07/56774-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2008
• Data de Término da vigência: 04 de março de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Glaucia Maria Machado Santelli
• Beneficiário: Andre Vieira Peixoto Davila
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Cromossomos politênicos Rhynchosciara
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cdk10 | Cromossomos Politenicos | Endociclo | Rhynchosciara

Resumo

O presente trabalho tem como objetivos caracterizar o gene Cdc2/CDK10 putativo, e analisar sua atuação nos endociclos de Rhynchosciara americana. Este transcrito foi obtido em uma varredura de uma biblioteca de cDNA de glândulas salivares construída durante o último ciclo de replicação do DNA e inicio da amplificação gênica. A seqüência obtida deste transcrito apresenta grande similaridade com uma proteína quinase envolvida na transição G2/M do ciclo celular denominada CDK10. As glândulas salivares de nosso modelo, neste momento, apresentam-se em um estado alterado do ciclo celular onde o DNA cromossômico passou por diversos ciclos de replicação sem que ocorresse divisão celular, fenômeno conhecido como endociclos ou endoreplicação. Estes são caracterizados por oscilações reguladas de um complexo CiclinaE/CDK2, necessárias para a progressão correta dos endociclos. Ainda não foi descrita na literatura a participação de uma Cdc2/CDK10 neste fenômeno. Portanto, pretende-se inicialmente completar o seqüenciamento do transcrito putativo Cdc2/CDK10 e utilizá-lo como sonda para obtenção de sua região genômica por meio de uma varredura de uma biblioteca de fagos. O clone genômico será utilizado para localização cromossômica do putativo gene por meio de hibridização in situ. O perfil de expressão será traçado por Real Time PCR. Experimentos de interferência por RNAi serão utilizados para analisar a atuação deste putativo gene nos endociclos de nosso modelo. (AU)