Modulacao de peroxirredoxinas em celulas beta produtoras de insulina expostas a citocinas

• Processo: 09/50274-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Antonio Carlos Boschiero
• Beneficiário: Flavia Maria Moura de Paula
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 07/50365-4 - Estudo dos mecanismos de destruição das células beta pancreáticas durante a instalação do Diabetes Mellitus (DM2): busca de estratégias para a inibição desse processo bem como para a recuperação da massa insular em diferentes modelos animais, AP.TEM
• Assunto(s): Citocinas Células secretoras de insulina Peroxirredoxinas Interleucinas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Celula Beta | Citocinas | Enzimas Anti-Oxidativas | Especies Reativas De Oxig | Interleucinas | Peroxirredoxinas

Resumo

As células beta pancreáticas são particularmente sensíveis à ação das citosinas e produzem uma grande quantidade de óxido nítrico quando expostas a interleucina-1beta (IL-1beta). Sabe-se que o estresse oxidativo e o nitrosativo contribuem para a perda da função e morte celular. As células beta são sabidamente deficientes em enzimas anti-oxidativas, em particular catalase e glutationa peroxidase. Por isso, sistemas anti-oxidativos adicionais podem ser de grande importância para sobrevivência destas células. As peroxirredoxinas são sistemas anti-oxidantes celulares envolvidas no catabolismo do peróxido de hidrogênio e eliminação de ROS (espécies reativas de oxigênio), podendo de essa maneira ser uma alternativa para a célula beta suprir a deficiência em outras enzimas anti-oxidantes. Entretanto existem poucos estudos sobre peroxirredoxinas em células beta. Nossa proposta para o projeto aqui apresentado é analisar se citosinas, tanto pro-(interleucina-1 beta, IL-1beta) como anti-inflamatória (interleucina-4, IL-4), alteram a expressão gênica e protéica das peroxirredoxinas (isoformas I-VI) em células produtoras de insulina RINmõF e quais as vias intracelulares envolvidas. Para tanto, utilizaremos PCR em tempo real e análises porwestern-blotting para os estudos de expressão. Embora já se saiba que as citosinas ativam a via das STATs, estudaremos também as vias intracelulares por meio de gene repórter (elementos responsivos ao AP1, NFkB, cMyc, NFAT, SRE, CRE), uma vez que outras vias podem agir cooperativamente para a modulação gênica. Subseqüentemente utilizaremos bloqueadores farmacológicos específicos ou antisenses para as vias que potencialmente mostrarem-se importantes para a modulação das peroxirredoxinas. (AU)