Modelos para a produção de eritropoietina recombinante humana in vivo e in vitro com vetores plasmideais em ovinos

• Processo: 08/56138-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2009
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: José Antonio Visintin
• Beneficiário: Mariana Ianello Giassetti
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Eritropoietina Ovinos Técnicas in vitro Transfecção
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Eritropoietina | Glandula Mamaria | In Vitro | In Vivo | Ovinos | Transfeccao

Resumo

O estabelecimento de sistemas biológicos, biorreatores, para a expressão de proteínas recombinantes é fundamental para a produção de biofármacos funcionais. Inicialmente esses sistemas baseavam-se em culturas bacterianas, no entanto pela ausência da glicosilação, muitas proteínas não se apresentavam funcionais. Foram então desenvolvidas culturas de células eucarióticas capazes de realizarem a forma terciária das proteínas recombinantes, porém resultando em um processo muito caro. Como alternativa foram produzidos animais transgênicos capazes de secretarem proteínas recombinantes em diferentes fluídos, tendo como principal alvo dessa produção, o leite, já que o tecido epitelial mamário apresenta grande capacidade de expressão de proteínas glicosiladas e a purificação dessas é facilmente executada. No entanto, a implementação desse sistema de produção também se mostrou muito caro e demorado, ainda mais que não existem métodos para testar o vetor de transgênese a não ser pela produção do animal. A eritropoietina humana (hEPO) já foi expressa no leite em camundongos, coelhos e suínos, no entanto, nos dois primeiros não apresentou boa atividade biológica pela falta de glicosilação. O presente projeto tem como objetivo a produção de hEPO no leite de ovelhas não transgênicas utilizando a técnica de lipofecção para testar dois vetores de expressão com diferentes promotores, antes da produção de ovinos trangênicos. Além disso será estabelecida uma cultura de células do epitélio mamário ovino na qual será verificada a expressão de genes relacionados a proteínas do leite, quando suplementada com soro de ovelha lactente. Uma vez funcionando este sistema será possível avaliar a eficiência dos vetores in vitro. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

GIASSETTI, Mariana Ianello. Modelos para a produção de eritropoietina recombinante humana in vivo e in vitro com vetores plasmideais em ovinos. 2011. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ/SBD) São Paulo.