Inducao de atividades epileptiformes nao-sinapticas e analise imunohistoquimica em fatias de hipocampo de ratos wistar kindelizados com pentilenotetrazol

• Processo: 08/58332-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Celular
• Pesquisador responsável: Ésper Abrão Cavalheiro
• Beneficiário: Aline Gisele Batista
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Giro denteado Imuno-histoquímica Epilepsia Pentilenotetrazol
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Atividades Nao Sinapticas | Epilepsia | Giro Denteado | Imunohistoquimica | Kingling | Pentilenotetrazol

Resumo

Os modelos kindling de epilepsia experimental são normalmente investigados em termos da atuação ou efeito sobre as conexões sinápticas. Mas, como as conexões não-sinápticas são suficientes para geração e sustentação das atividades epileptiformes, o presente trabalho foi elaborado com objetivo identificar os efeitos do kindling químico com PTZ sobre a indução de atividades epileptiformes não-sinápticas (AENS) no giro denteado (GD) do hipocampo de ratos Wistar (8 semanas). Esses animais receberão aplicação intraperitoneal de 45 MG/kg de PTZ em intervalos médios de 48 horas (máximo 15 sessões) e serão considerados kindelizados após apresentarem crises de estágio 4 ou 5 em três sessões subseqüentes (Associação dos protocolos de FRANKE et a), 2001 e KRUG et al, 1997). Fatias do hipocampo de animais kinde/izados e controle serão submetidas à indução de AENS através de perfusão com solução contendo zero-Ca2+ e alto K+. Essas fatias serão utilizadas no registro do potencial elétrico (PE) extracelular e para análise morfológica do tecido, realizada por meio do método Neo Timm (marcação de sprouting) e de imunohistoquímica (marcação de KCC2, NKCC1, astrócitos e microglias). Os parâmetros de análise do PE corresponderão a amplitude da componente DC, duração dos eventos (DE), intervalo inter-eventos (IE), populations spikes (PS) e latência (LT). Essa metodologia possibilitará verificar se as variações ocorridas nos parâmetros do PE de animais kindelizados estão associadas a variações na expressão dos cotransportadores de CI-. Também será possível analisar a densidade celular glial e neuronal no GD dos animais kindelizados e, no caso do surgimento de sprouting, verificar se sua presença interfere na redução do espaço extracelular. (AU)