| Processo: | 08/58612-3 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado |
| Data de Início da vigência: | 01 de abril de 2009 |
| Data de Término da vigência: | 31 de dezembro de 2012 |
| Área de conhecimento: | Ciências da Saúde - Medicina |
| Pesquisador responsável: | Paulo Inácio da Costa |
| Beneficiário: | Flavia Regina Kenfe |
| Instituição Sede: | Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Vírus da hepatite C |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Membrana De Nitrocelulose | Metodod Imunocromatografico | Proteina Core Recombinante | Virus Da Hepatite C |
Resumo O vírus da hepatite C (VHC) é um vírus envelopado com cerca de 50 a 70 nm de diâmetro, fita positiva de RNA e pertence ao gênero do Hepacivirus e à família Flaviridae. A detecção e quantificação do antígeno do core do VHC tem obtido sucesso em muitos ensaios, sendo considerado como um acurado e preciso marcador da replicação viral, apresentando alta sensibilidade e especificidade. Os testes utilizados para triagem sorológica devem apresentar alta. sensibilidade, detectarem a doença no estágio inicial e apresentarem baixo custo. Atualmente, todos os kits utilizados no Brasil para este diagnóstico são importados e compreendem testes sorológicos para detecção de anticorpos anti-VHC e testes moleculares, que detectam e quantificam o RNA do vírus da hepatite C (RNA-VHC). Em triagem de doadores de sangue, monitoramento de pacientes em hemodiálise e acidentes ocupacionais, o emprego de métodos qualitativos que possibilitem a determinação da replicação do VHC no período de janela imunológica, constitui uma importante ferramenta na prevenção da infecção. Os métodos atualmente utilizados baseiam-se no teste de ELISA para a detecção qualitativa de anticorpos séricos, não contribuindo para o diagnóstico na fase aguda da infecção. Em nosso trabalho, propomos o desenvolvimento de um novo método imunocromatográfico para a determinação conjunta de antígenos do core e anticorpos no sangue periférico, associados à infecção pelo VHC. Para isso, primeiramente será realizado os métodos imunocromatográficos separados, para posterior união. A precisão, exatidão e reprodutibilidade do novo método serão determinadas comparativamente aos métodos de amplificação viral (RNA-VHC/PCR; Amplicor Roche) e ELISA indireto (kit anti-HCV - ABBOTT - Murex versão 4.0). Para o desenvolvimento deste trabalho, primeiramente, será realizada a expressão de proteínas do core-VHC (procedimento já desenvolvido em nosso laboratório), seguida da produção de anticorpos monoclonais anti-core (colaboração com o laboratório do Prof. Dr. Marcelo Baruffi-FCF/USP-RP). Estes anticorpos monoclonais e as proteínas do core recombinantes serão imobilizados em membrana de nitro celulose para o desenvolvimento do teste imunocromatográfico, além de seu emprego em conjugado com ouro coloidal ou micro-esferas de látex coloridas para a captura do core-VHC e anticorpos anti-VHC, respectivamente. (AU) | |
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