Caracterização estrutural e funcional de enzimas envolvidas na biossíntese e acúmulo de sacarose em cana-de-açúcar

• Processo: 08/06767-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2009
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Marcelo Menossi Teixeira
• Beneficiário: José Sérgio de Macedo Soares
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Cristalografia de proteínas Reação em cadeia da polimerase em tempo real Duplo-híbrido Cinética enzimática
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cinética Enzimática | Cristalografia de Proteínas | duplo-híbrido | Real-Time PCR | Sucrose synthase | UDP-glucose pyrophosphorylase | Biologia Molecular

Resumo

A cana de açúcar é uma das mais importantes espécies vegetais cultivadas em todo o mundo, principalmente nas regiões tropicais e sub-tropicais, com uma área maior que 20 milhões de hectares em 101 países. O Brasil é o maior produtor participando com 25% da produção. As espécies de cana de açúcar são provenientes do Sudeste Asiático e têm uma grande importância econômica já que por séculos é a principal matéria prima para a fabricação do açúcar e recentemente do etanol, uma fonte de energia renovável. Neste trabalho foram selecionadas cinco proteínas envolvidas na biossíntese e acúmulo de sacarose em cana de açúcar (UDP-glicose pirofosforilase, sacarose sintase, sacarase fosfato fosfatase, sacarose fosfato sintase e invertase) com o objetivo de elucidar a estrutura tridimensional e a função exercida no metabolismo de sacarose. Os genes que codificam as proteínas citadas serão amplificados por meio da técnica de PCR em termocicladores localizados no Laboratório de Genônima Funcional (Instituto de Biologia - Unicamp) e clonados para expressão em sistema procarioto ou eucarioto. As proteínas deverão ser purificadas por métodos cromatográficos para a realização dos ensaios de cristalização e SAXS. Ensaios de PCR em tempo real para análise da expressão gênica e ensaios de interação proteína-proteína (duplo-híbrido) e cinética enzimática serão pertinentes para analisar a ação das proteínas durante o processo de biossíntese e acúmulo de sacarose em cana de açúcar.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

COTRIM, CAMILA A.; SOARES, JOSE SERGIO M.; KOBE, BOSTJAN; MENOSSI, MARCELO. Crystal structure and insights into the oligomeric state of UDP-glucose pyrophosphorylase from sugarcane. PLoS One, v. 13, n. 3, MAR 1 2018. (13/15576-5, 08/06767-3)

SOARES, JOSE SERGIO M.; GENTILE, AGUSTINA; SCORSATO, VALERIA; LIMA, ALINE DA C.; KIYOTA, EDUARDO; DOS SANTOS, MARCELO LEITE; PIATTONI, CLAUDIA V.; HUBER, STEVEN C.; APARICIO, RICARDO; MENOSSI, MARCELO. Oligomerization, Membrane Association, and in Vivo Phosphorylation of Sugarcane UDP-glucose Pyrophosphorylase. Journal of Biological Chemistry, v. 289, n. 48, p. 33364-33377, NOV 28 2014. (08/06767-3)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

SOARES, José Sérgio de Macedo. Caracterização estrutural e funcional da proteína UDP-glucose pirofosforilase envolvida na biossíntese e acúmulo de sacarose em cana de açúcar. 2013. Tese de Doutorado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia Campinas, SP.