Expressão de subunidades P2X em células de Leydig de camundongos em diferentes idades e interações entre as subunidades P2X2, P2X4, P2X6 formadoras de receptores funcionais

• Processo: 08/10000-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Celular
• Pesquisador responsável: Wamberto Antonio Varanda
• Beneficiário: Ligia Subitoni Antonio
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 06/50954-7 - Correntes iônicas e receptores na fisiologia de células excitáveis e não excitáveis, AP.TEM
• Assunto(s): Células intersticiais do testículo Western blotting Imunoprecipitação Receptores purinérgicos P2X Eletrofisiologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Células de Leydig | Eletrofisiologia | Imunoprecipitação | Receptores Purinérgicos P2X | RT-PCR Real Time | Western blot | Canais e Transporte

Resumo

Nos últimos anos, o ATP tem sido alvo de vários estudos ligados à sinalização intercelular. Há evidências de que ele possa atuar tanto como mediador de eventos rápidos (neurotransmissão, por exemplo), como também em processos celulares de longo prazo, envolvendo mecanismos ligados à proteína G. A ação do ATP na membrana celular se dá por meio de receptores purinérgicos do tipo P2X (canais iônicos ativados por ligantes) e P2Y (receptores acoplados à proteína G). Até o momento, já foram identificados e clonados sete subunidades de receptores P2X (P2X1 - P2X7), que se agrupam em trímeros, tanto homoméricos quanto heteroméricos, para formação de receptores funcionais. Os receptores homoméricos P2X1-7 e heteroméricos P2X1/2, P2X1/4, P2X1/5, P2X2/3, P2X2/6, P2X4/6 e P2X4/7 apresentam características biofísicas e farmacológicas distintas. O influxo de cálcio pelos receptores purinérgicos justifica em parte o aumento da concentração de Ca2+ intracelular ([Ca2+]i) observado em algumas situações fisiológicas, o que evidencia ser esta uma importante via envolvida nas respostas mediadas desses receptores "in vivo". O tratamento de células de Leydig de ratos e camundongos com ATP, causa aumento na [Ca2+]i e na secreção de testosterona, reforçando a hipótese de que a sinalização via Ca2+ pode contribuir para o controle da secreção de testosterona nessas células. As células de Leydig de camundongos apresentam subunidades P2X2, P2X4, P2X6 e P2X7, porém a participação funcional de receptores P2X7 e P2X4/7 foi descartada. Além disso, há indícios da presença de heterômeros P2X2/4/6 que exibem perfil farmacológico dominante para a subunidade P2X2. Dessa forma, o presente estudo tem por objetivo observar as interações entre as subunidades de receptores purinérgicos P2X em células de Leydig de camundongos adultos, analisando propriedades moleculares e eletrofisiológicas desses receptores.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ANTONIO, LIGIA S.; STEWART, ANDREW P.; VARANDA, WAMBERTO A.; EDWARDSON, J. MICHAEL. Identification of P2X2/P2X4/P2X6 heterotrimeric receptors using atomic force microscopy (AFM) imaging. FEBS Letters, v. 588, n. 12, p. 2125-2128, JUN 5 2014. (08/10000-0, 06/50954-7)