Expressão e caracterização de duas proteínas de superfície de Leptospira interrogans

• Processo: 09/02317-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2011
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Ana Lucia Tabet Oller do Nascimento
• Beneficiário: Renan Francisco Domingos
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 04/09948-8 - Clonagem e expressão de proteínas com potencial uso vacinal e em diagnóstico identificadas do genoma da bactéria Leptospira interrogans sorovar Copenhageni, AP.TEM
• Assunto(s): DNA recombinante Genômica funcional Biotecnologia Leptospira interrogans
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: dna recombinante | Expressão e purificação de proteínas | Genômica Funcional | Leptospira interrogans | Biotecnologia

Resumo

A leptospirose é uma zoonose de importância global que nos últimos anos vem sendo considerada uma das principais doenças infecciosa emergentes. A distribuição geográfica da doença é principalmente cosmopolita estando associada à baixa qualidade de vida da população. No Brasil, como em outros países em desenvolvimento, a maioria das infecções ocorre através do contato com águas contaminadas por urina de ratos (principais reservatórios da doença). Nesses países, a ineficácia ou inexistência de infra-estrutura e saneamento básico adequado são condições favoráveis às epidemias. Para impedir a expansão e controlar a doença são necessários não só a "implementação" das formas "convencionais" de controle, mas também o desenvolvimento de novas estratégias. Atualmente, acredita-se que o desenvolvimento de uma vacina efetiva e com mínimos efeitos adversos seja uma estratégia importante para complementar as formas de prevenção e controle da doença. Neste sentido, vários estudos têm sido conduzidos visando identificar e caracterizar antígenos relevantes envolvidos no processo de interação patógeno-hospedeiro.Neste sentido, o projeto propõe identificar no genoma de Leptospira interrogans sorovar Copenhageni, clonar e caracterizar 2 proteínas (LIC11834 e LIC12253). Estes genes serão amplificados a partir do DNA genômico de L. interrogans, e os insertos de DNA clonados em vetores apropriados utilizando E. coli como sistema hospedeiro de expressão. As proteínas recombinantes serão purificadas por cromatografia de afinidade a metal, analisadas quanto a sua estrutura pela técnica de dicroísmo circular e a imunogenicidade avaliada em soros de camundongos imunizados com as proteínas por ELISA e/ou Western blotting. (AU)