Identificacao e caracterizacao do(s) ligante(s) de artin m monomerica em mastocitos

• Processo: 09/52767-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia
• Pesquisador responsável: Constance Oliver
• Beneficiário: Valéria Cintra Barbosa Lorenzi
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 12/17797-6 - Ativação de mastócitos através de receptores de lectina tipo C para o reconhecimento de fungo, BE.EP.DR
• Assunto(s): Mastócitos Lectinas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Artin M | Desgranulacao | Lectina | Mastocitos

Resumo

Os mastócitos são células imunoreguladoras que participam dos mecanismos de defesa do organismo e de processos alérgicos e inflamatórios. O papel dos mastócitos nestes processos está relacionado com a liberação de seus mediadores químicos. Os mastócitos são ativados via receptor de alta afinidade para IgE ou por mecanismos que independem do receptor. A lectina Artin M é capaz de ativar mastócitos, mas os mecanismos pelos quais atuam na ativação continuam desconhecidos. O presente trabalho tem como objetivo identificar o ligante preferencial de rArtin M monomérico presente na superfície de mastócitos e avaliar a importância deste ligante na desgranulação ou ativação de mastócitos. Para tal, será utilizada a linhagem de mastócitos RBL-2H3 e mastócitos isolados da cavidade peritoneal de ratos. O lisado celular enriquecido de membrana plasmática será incubado com rArtin M biotinilada e, posteriormente, os ligantes serão precipitados com agarose-estreptoavidina. A fração contendo ligante de rArtin M será submetida à eletroforese bidimensional seguida de análise por espectrometria de massa. Após identificação do ligante, serão realizados ensaios de liberação de mediadores de mastócitos da linhagem RBL-2H3, visando caracterizar a resposta dos mastócitos ao estímulo por rArtin M. Para melhor caracterizar a resposta dos mastócitos frente à ligação de rArtin M ao seu ligante, os mesmos serão bloqueados ou inibidos por diferentes metodologias. Os conhecimentos obtidos poderão contribuir para o delineamento de intervenções terapêuticas, com o uso de Artin M, em processos de regulação da liberação de mediadores por mastócitos. (AU)