Biologia estrutural: expressão e caracterização estrutural de proteínas de Tomato chlorosis virus

• Processo: 09/12716-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2010
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Raghuvir Krishnaswamy Arni
• Beneficiário: Luana Gonçales Garcia
• Instituição Sede: Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José do Rio Preto. São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Doenças de plantas Tomate Crinivirus Tomato chlorosis virus Replicação viral Expressão de proteínas Cristalografia de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cristalização | Cristalografia de Proteínas | Expressão e Caracterização | Tomato chlorosis virus | Biologia Estrutural

Resumo

A replicação viral envolve a entrada do vírus na célula vegetal e o seqüestro do maquinário das hospedeiras para a produção das proteínas necessárias para a formação de novas partículas. Estudos moleculares dos vírus de plantas têm sido feitos como o seqüenciamento dos RNAs, a detecção dos RNAs subgenômicos e a determinação da estratégia para expressão do genoma do vírus. Entretanto, muitos aspectos a respeito da função e estrutura de algumas proteínas, bem como sua relação com o ciclo de replicação viral, ainda são desconhecidos. O presente projeto tem como objetivo a produção, em estado nativo, de duas proteínas estruturais codificadas pelo RNA 2 do Tomato chlorosis virus: proteína da capa (CP) de 29 kDa e proteína da cauda (CPm) de 76 kDa , a partir de expressão em Escherichia coli, tendo como alvo a obtenção de proteínas em grandes quantidades (miligramas) com alto grau de pureza para ensaios de cristalização para a determinação de suas estruturas tridimensionais em alta resolução, podendo assim trazer contribuições a cerca dos mecanismos e modos de funcionamento. Além disso, as proteínas purificadas serão também usadas para a produção de antissoros específicos visando a utilização na detecção do vírus em plantas. Além de constituírem a partícula viral estas duas proteínas também podem estar envolvidas no movimento viral entre células (espalhamento do vírus a curta distância na planta). (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

GARCIA, Luana Gonçales. Biologia estrutural: expressão e caracterização estrutural da proteína 25K do Cole latent virus. 2012. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Instituto de Biociências Letras e Ciências Exatas. São José do Rio Preto São José do Rio Preto.