Caracterização molecular do complexo ribonúcleoprotéico contendo dFOX-1 em células S2 de Drosophila melanogaster

• Processo: 09/17252-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Maria Luisa Paçó-Larson
• Beneficiário: Gustavo Borges Pereira
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Processamento alternativo Drosophila melanogaster
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Células S2 | dFOX-1 | Drosophila melanogaster | P-bodies | Splicing alternativo | Caracterização de novas Proteínas Conservadas Evolutivamente

Resumo

A proteína FOX-1, chamada também de A2BP1, foi identificada inicialmente por interagir com a ataxina-2, o produto do gene associado com a ataxia espinocerebelar humana do tipo 2. FOX-1 é conservada evolutivamente possuindo ortólogas em vários organismos metazoários. Essa família de proteínas caracteriza-se por possuir o domínio RRM, compatível com função relacionada ao metabolismo de RNA. Em C. elegans, estudos genéticos relacionaram Fox-1 com a determinação de sexo, agindo como um repressor pós-transcricional do gene determinante de sexo xol-1. Fox-1 também foi encontrada em regiões do cérebro, tecidos cardíaco e muscular esquelético de camundongos, além de apresentar níveis variados de expressão durante a embriogênese inicial dos murinos. Experimentos in vitro indicam que as proteínas de camundongo e zebrafish controlam splicing alternativo tecido específico. Em D. melanogaster¸ este locus gênico, por nós denominado de dFox-1, ainda não foi caracterizado. Resultados de imunodetecção com anticorpo gerado em nosso laboratório mostram a localização de dFox-1 predominantemente concentrada em focos citoplasmáticos, em células S2R+ e discos imaginais. Este padrão de localização sub-celular é alterado frente a tratamento com ciclohexemida, puromicina e RNase, de modo semelhante ao descrito para proteínas presentes em corpos de processamento de mRNA conhecidos como p-bodies. Considerando a importância dos p-bodies no controle da tradução/estabilidade de mRNAs, neste projeto propomos estender a caracterização da localização sub-celular de dFox-1 nas células S2 de D. melanogaster, e identificar os componentes protéicos e ribonucléicos dos complexos que contêm esse novo membro da família Fox-1.