Acao do forskolin na distribuicao de mitocondrias e de granulos lipidicos citoplasmaticos em oocitos e embrioes bovinos produzidos in vitro: implcacoes na resistencia a criopreservacao.

• Processo: 10/50410-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Fernanda da Cruz Landim
• Beneficiário: Daniela Martins Paschoal
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Bovinos Maturação Técnicas in vitro Criopreservação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bovino | Criopreservacao | Embirao | Forskolin | Maturacao | Producao In Vitro

Resumo

O forskolin é um agente ativador da adenilato ciclase e está relacionado aos níveis de adenosina mono fosfato cíclicos (cAMP), a qual consiste no principal sistema de regulação da lipólise intracelular. Alem disso, o tratamento de oócitos durante a MIV com forskolin impede o recomeço da meiose fazendo com que os oócitos sofrem uma transição mais regulada e apropriada da prófase I para a metáfase II. Esse projeto parte da hipótese de que a adição de forskolin tanto durante a maturação oocitária, como durante o cultivo embrionário influenciará positivamente a produção de embriões e que este efeito induzirá uma melhor resposta a vitrificação. No experimento 1 será avaliado o efeito da adição de forskolin na maturação in vitro (MIV) de oócitos bovinos. Oócitos serão maturados in vitro nos grupos: G1: Grupo controle (MIV por 22 horas); G2: Grupo tratado com forskolin por 12 horas (incubação em meio contendo 0,1mM de forskolin por 12 horas, seguida de 22 horas de MIV) e G3: Grupo tratado com forskolin por 24 horas (incubação em meio contendo 0,1 mM de forskolin por 24 horas, seguida de 22 horas de MIV). A avaliação do estágio de maturação nuclear, bem como quantidade e distribuição de lipídeos e mitocôndrias, será realizada antes do início da MIV, bem como após o final desta. Após estas avaliações serão produzidos embriões in vitro, a partir dos oócitos de todos os grupos, os quais serão novamente avaliados. No experimento 2 será avaliada a ação do forskolin na lise de lipídios, morfologia e distribuição de mitocondrias e apoptose em embriões PIV frescos e submetidos à vitrificação. Serão utilizados 3 grupos experimentais: G1: grupo controle (sem adição do forskolin), G2: grupo tratado com forskolin no dia 4,5 de cultivo e G3: grupo tratado com forskolin no dia 6 de cultivo. Os embriões produzidos serão vitrificados e avaliados quanto à concentração de lipídio, as mitocôndrias e o índice de apoptose. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

PASCHOAL, DANIELA MARTINS; DIAS MAZIERO, ROSIARA ROSARIA; SUDANO, MATEUS JOSE; GUASTALI, MIDYAN DAROZ; VERGARA, LUIS EDUARDO; CROCOMO, LETICIA FERRARI; DE LIMA-NETO, JOAO FERREIRA; ONA MAGALHAES, LUIS CARLOS; MONTEIRO, BIANCA ANDRIOLO; RASCADO, TATIANA DA SILVA; et al. In vitro embryos production after oocytes treatment with forskolin. ZYGOTE, v. 24, n. 2, p. 161-171, APR 2016. (10/50410-2, 11/08926-4)

PASCHOAL, DANIELA MARTINS; SUDANO, MATEUS JOSE; LANCELLOTTI SCHWARZ, KATIA REGINA; DIAS MAZIERO, ROSIARA ROSARIO; GUASTALI, MIDYAN DAROZ; CROCOMO, LETICIA FERRARI; ONA MAGALHAES, LUIS CARLOS; MARTINS, JR., ALICIO; VERDE LEAL, CLAUDIA LIMA; LANDIM-ALVARENGA, FERNANDA DA CRUZ. Cell apoptosis and lipid content of in vitro-produced, vitrified bovine embryos treated with forskolin. Theriogenology, v. 87, p. 108-114, JAN 1 2017. (10/50410-2, 14/21289-1, 11/08926-4)