Delineando alvos e limites para indicação do adenovírus bicistrônico Adp16IRESp53 no tratamento de glioblastoma humano

• Processo: 10/14505-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2011
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Eugenia Costanzi-Strauss
• Beneficiário: Pollyana Bulgarelli Stevanatto
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Neoplasias Proliferação celular Ciclo celular Genes p53
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: câncer | ciclo celular | p16INK4A | p53 | Rb | Câncer e ciclo celular

Resumo

Câncer é produto do acúmulo de mutações e a combinação de perda funcional de p16INK4A e p53 é o evento mais comum nos carcinomas. Assim, é lógico investigar o efeito da reposição combinada e simultânea de p16INK4A e p53 nas células tumorais. Nós já construímos e produzimos o vetor adenoviral bicistrônico Adp16IRESp53 e os monocistrônicos Adp16, Adp53 e AdeGFP e AdLacZ. Os ensaios de produção e caracterização demonstraram a integridade de nossos vetores, confirmaram a expressão de ambos os transgenes e a funcionalidade do elemento IRES. Utilizando como modelo células de carcinoma de pulmão humano H358, que não expressam p53 ou p16INK4A, pudemos mostrar in vitro e in vivo o potente efeito supressor da proliferação celular de Adp16IRESp53. Entretanto, estender os resultados obtidos agora para o tratamento de tumores de diferentes origens histológicas é o verdadeiro teste para uma estratégia envolvendo vetores multigênicos e principalmente neste caso onde o alvo de tratamento é comum a todos os cânceres, ou seja ciclo celular. Neste projeto pretendemos investigar o efeito inibidor da proliferação de Adp16IRESp53 sobre células de glioblastoma (GBM) humano, utilizando como modelo experimental as linhagens U87, U251, A172 e T98G. Pretendemos tanto desafiar a ação da remediação bicistrônica frente a presença de diferentes perfis mutacionais de p53 presentes nas células de GBM, quanto analisar diversos regimes de administração dos vetores mono e bi-supressores de tumor, comparando assim o efeito da reparação simples mediada por vetor monocistrônico versus reparação dupla mediada por dois vetores monocistrônicos, neste caso de duas formas diferentes: co-transdução simultânea ou sequencial e reparação bicistrônica onde um único vetor transfere dois genes: p53 e p16INK4A.