Expressão recombinante e caracterização de uma endoxilanase não descrita de Trichoderma harzianum

• Processo: 10/04635-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2011
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Flavio Henrique da Silva
• Beneficiário: Wesley Cardoso Generoso
• Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Biotecnologia Endo-1,4-beta-xilanases Hidrolases Trichoderma harzianum Reação em cadeia da polimerase em tempo real
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: expressão heteróloga | hidrolases | trichoderma | Xilanases | Genética e Bioquímica

Resumo

A biotecnologia moderna tem mudado o rumo dos processos produtivos, tornando-os mais baratos e com um menor descarte de resíduos indesejáveis. Neste âmbito, as enzimas têm sido empregadas em várias técnicas por sua especificidade e versatilidade em processos industriais. Xilanases têm sido aplicadas em diversos setores, como no biobranqueamento da polpa de papel, na bioconversão de biomassa de plantas, nas indústrias alimentícias e de ração animal, e, por isso, são atualmente umas das hidrolases mais estudadas. As características de interesse procuradas nas xilanases são: uma atividade satisfatória a pH básico e temperatura alta, e uma produção livre de celulases. Estes fatores tornariam a produção de polpa de celulose mais barata e com maior qualidade. Assim, o presente trabalho visa produzir, de forma heteróloga, uma endoxilanase ainda não descrita do fungo Trichoderma harzianum, avaliando as características enzimáticas e a expressão desta enzima. Isto abriria perspectivas para estudos futuros com aplicação desta enzima e possibilitaria o entendimento do funcionamento de indução da produção de xilanase no fungo. Para expressão recombinante o hospedeiro utilizado será Pichia pastoris, e a proteína purificada será empregada em testes enzimáticos, a fim de se caracterizá-la quanto a parâmetros bioquímicos e cinéticos. A análise de expressão da endoxilanase será realizada por PCR em tempo real, utilizando xilana e celulose como fontes indutoras. (AU)