Expressão em Escherichia coli, purificação, refolding e Análise Estrutural das proteínas do movimento e da capa proteica do Rupestris stem pitting associated virus

• Processo: 10/19259-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Raghuvir Krishnaswamy Arni
• Beneficiário: Ricardo Barros Mariutti
• Instituição Sede: Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José do Rio Preto. São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 11/23680-1 - Expressão em Escherichia coli, purificação, refolding e análise estrutural da proteína da capa protéica do rupestris stem pitting associated vírus, BE.EP.DR
• Assunto(s): Virologia Purificação Escherichia coli
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: capa proteíca | Escherichia coli | Proteína do movimento | purificação | refolding | Rupestris stem pitting associated virus | Virologia

Resumo

A videira é a frutífera economicamente mais importante no mundo e é cultivada para que seus frutos produzam uvas de mesa, suco, e uvas passas. As bagas da videira são também a base para o alto valor agregado dos vinhos e outras bebidas alcoólicas. O Rupestris stem pitting associated virus - RSPaV foi identificado como o agente causador da doença do lenho estriado ou cascudo ("Rupestris stem pitting" - RSP), um dos componentes do complexo do lenho rugoso da videira ("Rugose wood" - RW). Esta doença é transmitida por enxertia e constitui uma das viroses de videira mais disseminadas no mundo, sendo descrita no Brasil no final dos anos 60. Devido à dificuldade de purificação das partículas virais a partir da videira infectada, a expressão em larga escala de proteínas virais em bactérias é uma estratégia promissora para o entendimento de suas propriedades. O presente trabalho tem como objetivo a produção, em estado nativo, das proteínas da capa protéica (CP) de 28 KDa e proteína do movimento (MP) de 24,4 KDa, codificadas pelo RNA do Rupestris stem pitting associated virus. A partir da expressão em Escherichia coli, tendo como alvo a obtenção de proteínas em grandes quantidades (miligramas) com alto grau de pureza para ensaios de cristalização, a determinação de suas estruturas tridimensionais em alta resolução, poderão trazer contribuições a cerca dos mecanismos e modos de funcionamento uma vez que estudos de cristalização e análise por raios-X, que pudessem fornecer dados sobre a estrutura das partículas virais, são escassos.

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

MARIUTTI, Ricardo Barros. Expressão, purificação e caracterização de proteínas dos fitovírus SBMV e RSPaV. 2014. Tese de Doutorado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Instituto de Biociências Letras e Ciências Exatas. São José do Rio Preto São José do Rio Preto.