Análise da expressão de microRNAs nos tecidos nervoso e muscular esquelético através da Reação em Cadeia de Polimerase com transcrição reversa.

• Processo: 08/03380-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia do Esforço
• Pesquisador responsável: Guilherme de Araújo Lucas
• Beneficiário: Rodrigo Martins Merino
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 07/07166-0 - Ação do exercício físico sobre a expressão de microRNAs nos sistemas nervoso e muscular esquelético., AP.R
• Assunto(s): Neurofisiologia Reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa (RT-PCR) Amplificação de genes MicroRNAs
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: amplificação gênica | microRNA | Rt-Pcr | Neurofisiologia

Resumo

MicroRNAs (miRs) representam uma nova classe de RNAs não-codificadores (ncRNA) que agem como potentes reguladores da expressão de diversos genes em tecidos específicos e em condições determinadas. A caracterização de miRs têm oferecido uma visão completamente nova dos mecanismos de regulação pós-transcricional, influenciando diversos mecanismos celulares como diferenciação, crescimento, apoptose, metabolismo e atividade sináptica. A identificação de miRs tem sido feita, principalmente, através da técnica de Northern blot, cuja principal deficiência em relação ao monitoramento de miRs é sua a baixa especificidade, detectando não somente as formas maduras de miRs, mas também suas formas precursoras, denominadas de pré-microRNAs. Recentemente, foi desenvolvimento metodologia de identificação de miRs através da Reação em Cadeia de Polimerase com transcrição reversa (RT-PCR), monitorando, com grande especificidade, somente as formas maduras de miRs. Assim, este projeto investigará o perfil de miRs no músculo sóleo, no gânglio da raiz dorsal e nas colunas dorsal e ventral da medula espinal, através da técnica de RT-PCR. Será analisada a expressão de miR-1, miR-16, miR-122a e miR-206, que estão envolvidos na regulação da expressão de BDNF (Brain derived neurotrophic factor), um fator neurotrófico da família das neurotrofinas e o miR-133, que junto com miR-1 são expressos em células musculares cardíaca e esquelética. Será investigado o efeito da duração e intensidade do treinamento físico (natação) sobre a expressão de miRs no sistema nervosos e na musculatura esquelética e o efeito do destreinamento sobre o perfil de expressão de miRNAs. Objetivos específicos1 - Investigar se a expressão de miRs nos sistemas nervoso e na fibra muscular esquelética é dependente da intensidade do treinamento físico.2 - Investigar se a expressão de miRs no sistema nervoso e na fibra muscular esquelética é dependente da duração do treinamento físico. 3 - Investigar se as alterações na expressão de miRs induzidas pelo exercício físico são reversíveis pelo destreinamento.