Otimização da técnica de isolamento de grânulos de neuromelanina e análise morfológica da neuromelanina na substância negra

• Processo: 11/07946-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2011
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
• Pesquisador responsável: Renata Elaine Paraizo Leite
• Beneficiário: Mariana Molina
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Substância negra Análise morfológica Patologia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Análise Morfológica | Cérebro humano | Neuromelanina | Otimização protocolo | Substância negra | Patologia

Resumo

Atualmente muitas questões ainda permanecem sem resposta a respeito da melanina no encéfalo. Ainda não é claro porque somente uma porcentagem dos neurônios dopaminérgicos produz neuromelanina dentro do seu citoplasma, pouco se sabe sobre a estrutura da neuromelanina e o entendimento de sua gênese e função dentro das células ainda permanece especulativa. Neste sentido, o presente trabalho tem por objetivo otimizar o protocolo de isolamento dos grânulos de neuromelanina da substância negra do encéfalo de indivíduos cognitivamente normais com idade igual ou superior a 50 anos utilizando, com modificações, o protocolo estabelecido por Tribl et al. (2005) e analisar as características morfológicas e a qualidade dos grânulos de neuromelanina. O material congelado a ser utilizado será proveniente do Banco de Encéfalos Humanos da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo. Serão isolados os grânulos de neuromelanina da substância negra de 5 indivíduos com 50 anos de idade ou mais no momento do óbito. Os grânulos de neuromelanina serão isolados utilizando fracionamento subcelular. A qualidade dos grânulos isolados, a preservação dos grânulos e as características ultra-estruturais serão monitoradas por microscopia eletrônica. O protocolo a ser utilizado engloba várias etapas modulares que podem facilmente serem ajustadas par qualquer outra organela e as otimizações propostas poderão colaborar para obter uma maior quantidade de material. Além disso, um olhar atento para as organelas celulares irá permitir um avanço no entendimento da estrutura e desenvolvimento da neuromelanina.