Imobilização da enzima nucleosídeo difosfato quinase (NDK) de Leishmania major em capilares de sílica: estudo de condições

• Processo: 11/20962-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2011
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Exatas e da Terra - Química - Química Orgânica
• Pesquisador responsável: Carmen Lúcia Cardoso
• Beneficiário: Juliana Maria de Lima
• Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 08/04371-5 - Desenvolvimento e aplicação de colunas enzimáticas na triagem de inibidores seletivos e no monitoramento do trabalho fitoquímico de produtos naturais, AP.JP
• Assunto(s): Imobilização de enzimas Produtos naturais Leishmaniose
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: estudos enzimáticos on line | imobilização de enzimas | inibidores seletivos | Leishmaniose | Nucleosídeo Difosfato Quinase | Produtos Naturais

Resumo

A necessidade de novas substâncias que possam atuar como fármacos em potencial para cura de inúmeras doenças tem impulsionado o desenvolvimento de técnicas rápidas e eficientes de análise para a identificação dessas moléculas reduzindo o número de potenciais candidatos. Aliada também a essa busca ocorreu o desenvolvimento de ensaios de alta eficiência que permitiram a utilização de enzimas, receptores entre outros alvos para a avaliação rápida de grande quantidade de amostra e também a análise de ligantes a esses alvos; permitindo assim, a identificação de fármacos que se liguem especificamente a alvos biológicos. A identificação de fármacos que atuam como inibidores pode ser feita utilizando-se biomoléculas (proteína, receptor ou enzima) em solução ou imobilizadas. No caso de enzimas imobilizadas, os biorreatores resultantes podem ser acoplados a sistemas de cromatografia liquida de alta eficiência e utilizados como colunas cromatográficas. De uma forma geral, quanto maior a afinidade das substâncias de interesse pela biomolécula imobilizada, maior será o tempo de retenção, o que representa melhores inibidores. A utilização de enzimas imobilizadas apresenta vantagens sobre ensaios com enzimas em solução como a estabilidade da enzima e sua reutilização, além da necessidade de pequenos volumes de amostra. Neste projeto, biorreatores enzimáticos serão preparados com a utilização da enzima Nucleosídeo Difosfato Quinase (NDK), a qual é liberada no processo de crescimento, após a infecção do pátogeno causador da Leishmaniose. Os biorreatores serão utilizados nos estudos de triagem e na identificação de inibidores seletivos.