Efeitos do diâmetro oocitário, configuração da cromatina em VG e avaliação da atividade quinase p34cdc2 na maturação in vitro de oócitos caninos.

• Processo: 11/13197-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2012
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Maria Denise Lopes
• Beneficiário: Leda Maria Costa Pereira
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Cadelas Técnicas de maturação in vitro de oócitos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cadela | configuração da cromatina | diâmetro oocitário | maturação oocitária | proteina quinase p34cdc2 | Biotécnicas da Reprodução

Resumo

A maioria dos protocolos de maturação oocitária in vitro tem apresentado resultados insatisfatórios, ou seja, os oócitos permanecem em estágio de vesícula germinativa, a despeito das condições de cultivo utilizadas. Entre as proteínas mais importantes que regulam o mecanismo da maturação estão o MPF (fator promotor da maturação) constituído pelas subunidades cdk1 ou p34cdc2 e a ciclina B1. A aquisição da competência meiótica está associada com a ativação da p34cdc2 no final do desenvolvimento oocitário, desempenhando essa proteína um papel mais central na regulação da ativação do MPF. Estudos indicam que a atividade do MPF é regulada pela localização espacial e concentração de suas subunidades no citoplasma celular e que a atividade dessas proteínas mostra-se tempo dependente no processo de maturação. Dessa forma, o estudo dessas proteínas pode colaborar com o estabelecimento de um período ótimo para a maturação in vitro de oócitos caninos. Esse trabalho tem por objetivo avaliar a influência dos oócitos provenientes de diferentes fases do ciclo estral no diâmetro dos oócitos, na configuração da cromatina em VG, na competência dos oócitos, assim como avaliar a cinética da atividade quinase p34cdc2 durante a maturação in vitro de oócitos caninos nos tempos 24, 48 e 72 horas. Os ovários serão coletados de cadelas consideradas hígidas ao exame clínico e de diversas raças, com idade entre 1 e 5 anos, submetidas à ováriosalpingohisterectomia (OSH) eletiva. Os ovários serão classificados de acordo com a condição reprodutiva (fase luteal, fase folicular e anestro). Os oócitos serão selecionados com base na mensuração do seu diâmetro, sendo utilizados para a maturação in vitro apenas os oócitos com diâmetro superior a 130mm incluída a zona pelúcida. A avaliação da configuração nuclear dos oócitos caninos será realizada antes (0h) e após (72h) a maturação in vitro. A configuração da cromatina em VG será determinada utilizando a microscopia de fluorescência baseada na descrição de Chohan e Hunter (2003). A avaliação da cinética da atividade quinase p34cdc2 será realizada através de ensaio imunoenzimático (ELISA) em diferentes momentos da maturação in vitro.

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

PEREIRA, Leda Maria Costa. Efeitos do diâmetro oocitário, configuração da cromatina em VG e avaliação da atividade quinase p34cdc2 na maturação in vitro de oócitos caninos. 2014. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. Botucatu Botucatu.