Efeitos da expressão do gene SPARC em células câncer de mama em cultura.

• Processo: 12/01387-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2012
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Maria Aparecida Nagai
• Beneficiário: Lourival Antunes de Oliveira Filho
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 10/16543-5 - Estudo do papel funcional dos genes PAR-4 e SPARC na sobrevida e quimiosensibilidade em câncer de mama, AP.R
• Assunto(s): Genética molecular Neoplasias mamárias Expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Câncer de mama | expressão gênica | Sparc | Genética Molecular

Resumo

ATIVIDADES A SEREM DESENVOLVIDAS PELO BOLSISTA - TT IIINome: Lourival Antunes de Oliveira FilhoA bolsista receberá treinamento e executará técnicas de Biologia Celular e Molecular importantes para o desenvolvimento do projeto. A participação do bolsista será voltada ao desenvolvimento das atividades relacionadas ao estudo funcional do gene SPARC em células de câncer de mama e deverá impactar na obtenção de resultados associados aos objetivos abaixo:1.Investigar os efeitos da expressão do gene SPARC na proliferação, apoptose e migração de células de câncer de mama em cultura.1.Avaliar o efeito da expressão do SPARC na resposta das células de câncer de mama ao docetaxel e 5-FU em cultura de células 2D e 3D. 1.Determinar o proteoma de células MDA-MB-231 com e sem expressão de SPARC em cultura de células em 2D e 3D e avaliar o interatoma antes e após exposição ao docetaxel.O bolsista receberá treinamento e executará as seguintes técnicas:- Cultura de diferentes linhagens de células de câncer de mama para manutenção, expansão e congelamento de ampolas em nitrogênio líquido. - Cultivo de células para ensaios de proliferação, viabilidade celular e migração.- Imunofluorescência em células de câncer de mama mantidas em cultura 2D e 3D- Extração de RNA, síntese de cDNA - Análise de expressão gênica por PCR em tempo real- Extração e quantificação de proteínas de diferentes linhagens celulares de câncer de mama crescidas mantidas em diferentes condições.- Eletroforese de proteínas e Western Blot