Produção de vetores recombinantes para expressão de diferentes formas da proteína K1 do Herpesvírus Associado ao Sarcoma de Kaposi (KSHV)

• Processo: 11/23234-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2012
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2013
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
• Pesquisador responsável: Deilson Elgui de Oliveira
• Beneficiário: Renata Nacasaki Silvestre
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FMB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Anatomia patológica Sarcoma de Kaposi Herpesvirus humano 8 Clonagem Técnicas in vitro Técnicas de genotipagem Reação em cadeia por polimerase (PCR)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Carcinogênese Viral | clonagem | estudo in vitro | genotipos virais | Herpesvírus associado ao sarcoma de kaposi (KSHV) | Proteína K1 viral | Carcinogênese viral

Resumo

O Herpesvírus Associado ao Sarcoma de Kaposi (KSHV), ou Herpesvírus Humano Tipo 8 (HHV-8), é um gama Herpesvírus associado ao desenvolvimento de todas as formas de Sarcoma de Kaposi (SK), notadamente em indivíduos imunocomprometidos. O ciclo biológico do KSHV é tradicionalmente dividido em duas fases de expressão gênica, denominadas latência e ciclo lítico. Dentre os produtos virais expressos predominantemente durante ciclo lítico, destaca-se a proteína K1, a qual proporciona aumento da sobrevivência e proliferação da célula infectada em virtude de interferência em vias de transdução de sinais intracelulares. Por apresentar elevada variabilidade em relação aos outros segmentos do genoma viral, a ORF-K1 é comumente analisada em estudos de genotipagem do KSHV. Até o momento não se sabe se diferentes genótipos do vírus apresentam características biológicas peculiares, que possam modificar o potencial cancerígeno desse vírus. O presente estudo visa contribuir no estabelecimento de modelo experimental para análise dos efeitos biológicos da expressão de diferentes formas de proteína K1 do KSHV. Para tanto, na presente proposta de iniciação científica será efetuada a preparação de vetores de DNA recombinantes contendo a ORF-K1 do KSHV de genótipos A, B e C empregando métodos de clonagem. Linhagens de células humanas serão transfectadas de modo a se validar os vetores produzidos quanto à expressão da ORF-K1 em nível transcricional (por meio de métodos baseados na reação em cadeia da polimerase). Ao final do trabalho pretende-se que vetores recombinantes contendo a ORF-K1 do KSHV dos principais genótipos virais (A, B e C) tenham sido produzidos e possam ser utilizadas em estudos funcionais posteriores.(AU)