Estudo molecular da resistência a bacteriófagos líticos em cepas patogênicas de Salmonella enterica subs. enterica serovar Enteritidis

• Processo: 11/11761-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2012
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2015
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Patologia Animal
• Pesquisador responsável: Paulo Eduardo Martins Ribolla
• Beneficiário: Letícia Amaral Nogueira Alonso
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Bacteriófagos Salmonella enteritidis Biotecnologia Resistência microbiana a medicamentos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bacteriófagos | Fagoterapia | Resistência | Salmonella | salmonella enteritidis | salmonelose | Biotecnologia

Resumo

Salmonella Enteritidis é um patógeno pertencente à família Enterobacteriaceae que frequentemente está relacionada à toxinfecções alimentares em humanos, principalmente em crianças, idosos e pacientes imunossuprimidos. A importância desse microorganismo se dá pela sua prevalência significativa com distribuição mundial nos lotes de frangos de corte e de postura de ovos, levando a sérias implicações na saúde pública e ao mercado avícola. O controle eficaz da salmonelose é um desafio, pois envolve um complexo manejo dos animais e tratamento com uso de antibióticos que não garantem a eliminação da infecção. O uso de bacteriófagos líticos contra infecções bacterianas (fagoterapia) vem atender uma demanda crescente por alternativas ao tratamento antimicrobiano convencional. Todavia, a literatura tem relatado o surgimento de certa resistência bacteriana a alguns bacteriófagos líticos, como por exemplo, em Salmonella sp. Diversos são os mecanismos bacterianos de resistência aos fagos, tais como a prevenção de adsorção, o bloqueio da injeção do DNA do fago, restrição-modificação, infecção abortiva e o mais recentemente descrito na literatura, o sistema CRISPR/Cas de imunidade adquirida. Assim sendo, o presente projeto visa estudar em nível molecular a resistência bacteriana de fagos líticos isolados contra cepas patogênicas de Salmonella enterica subs. enterica serovar Enteritidis (SE). Para tal, os mecanismos escolhidos foram o sistema CRISPR/Cas e o bloqueio da adsorção de fagos via LPS. Resultados preliminares mostraram que cepas resistentes aos fagos líticos de SE possuem um número maior de espaçadores no locus CRISPR em relação às cepas sensíveis. A análise filogenética das sequencias dos genes cas1, cas2 e cas3 agrupou as cepas de SE em dois grandes clados, um ramo de cepas sensíveis a fagos e outro ramo que contém na sua maioria as cepas resistentes. As duas cepas mais distintas na árvore gerada foram uma das mais resistentes aos fagos. Interessantemente, essas duas linhagens possuem também um maior número de espaçadores de CRISPR. A análise feita dos genes relacionados com LPS mostrou que dentre os genes pesquisados os genes rfaC, rfaH, cpsG, manB e manC tiveram correlação com a resistência. Tais resultados apontam possíveis candidatos para marcadores moleculares de resistência a fagos em Salmonella Enteritidis. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

ALONSO, Letícia Amaral Nogueira. Estudo molecular da resistência a bacteriófagos líticos em Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis. 2015. Tese de Doutorado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Instituto de Biociências. Botucatu Botucatu.