Expressão gênica dos transportadores de membrana ABCB1, ABCG2, SLC22A1 e SLCO1A2 em linhagens celulares tratados com inibidor comercial da via JAK-STAT

• Processo: 12/01081-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2012
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Elvira Maria Guerra Shinohara
• Beneficiário: Guilherme Wataru Gomes
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Audiologia Hematologia Neoplasias da medula óssea Mielofibrose primária Cultura de células Expressão gênica Proliferação celular Reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa (RT-PCR)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: cultura celular | expressão gênica | inibidor da via JAK-STAT | Jak2 | Mielofibrose | transportadores de membrana | Hematologia

Resumo

A Mielofibrose (MF) é uma Neoplasia Mieloproliferativa (NMP) cromossomo Philadelphia negativo caracterizada pelo desenvolvimento de fibrose na medula óssea em resposta à proliferação celular. A descoberta da mutação JAK2V617F e sua relação com a MF tornou possível o desenvolvimento de fármacos direcionados para a inibição da proteína JAK2. Entretanto, pouco se conhece sobre os mecanismos envolvidos no influxo e efluxo celular dos inibidores da via JAK-STAT, que podem representar mecanismos de resistência e variabilidade de resposta ao fármaco. Esse estudo se propõe a analisar o efeito de um inibidor comercial da via JAK-STAT na regulação da expressão de RNAm dos genes que codificam os transportadores de membrana ABCB1, ABCG2, SLC22A1 e SLCO1A2, além de avaliar a expressão dos mesmos em diferentes linhagens celulares. Linhagens de células HEL921.7, SET2 (positivas para a mutação JAK2V617F), HepG2 e Caco-2 serão cultivadas e tratadas com diferentes concentrações do inibidor comercial da via JAK-STAT por diferentes períodos. Após testes de crescimento e viabilidade celular, será extraído o RNAm das células e sintetizado o cDNA, para análise das expressões dos genes ABCB1, ABCG2, SLC22A1 e SLCO1A2, feitas por real time RT-PCR. A expressão dos transportadores de membrana codificados por esses genes será avaliada por citometria de fluxo. Com o resultado do presente estudo, espera-se contribuir para a melhor compreensão da farmacocinética dos inibidores da via JAK-STAT e dos possíveis mecanismos envolvidos na variabilidade de resposta ao fármaco.(AU)