Detecção e subgenotipagem de Cryptosporidium cuniculus em amostras fecais de coelhos por meio de PCR em tempo real e análise da curva de dissociação em alta resolução

• Processo: 12/09079-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2012
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Medicina Veterinária Preventiva
• Pesquisador responsável: Marcelo Vasconcelos Meireles
• Beneficiário: Milena Sato de Souza
• Supervisor: Stephen James Hadfield
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária (FMVA). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araçatuba. Araçatuba , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: National Health Service Wales (NHS Wales), País de Gales
• Vinculado à bolsa: 11/02730-0 - Ocorrência e caracterização molecular de Cryptosporidium spp. em roedores e lagomorfos utilizados como animais de companhia, BP.MS
• Assunto(s): Doenças parasitárias em animais Reação em cadeia da polimerase em tempo real Coelhos Cryptosporidium
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Coelhos | Cryptosporidium cuniculus | Hrm | PCR Tempo Real | Enfermidades Parasitárias dos Animais

Resumo

Cryptosporidium cuniculus foi originalmente detectado em coelhos e tem sido identificado como um patógeno humano. No entanto, a ocorrência, prevalência e a epidemiologia da criptosporidiose causada por C. cuniculus em populações humanas e em coelhos ainda são pouco estudadas. Como a identificação de C. cuniculus pode ser demorada e de alto custo usando ensaios de biologia molecular já existentes, como a nested PCR seguida de sequenciamento dos fragmentos amplificados, neste experimento será utilizada a PCR em tempo real, visando à amplificação de fragmentos do gene da glicoproteína gp60, específicos para os subtipos Va e Vb de C. cuniculus. A PCR em tempo real será realizada com o fluoróforo SYBR Green e dois conjuntos de oligonucleotídeos iniciadores, específicos para os subtipos pesquisados. Após o término da reação, o produto amplificado será submetido à análise da curva de dissociação em alta resolução (HRM). (AU)