Avaliação estrutural e molecular da junção neuromuscular no músculo diafragma de ratos com insuficiência cardíaca submetidos ao treinamento aeróbico

• Processo: 12/17369-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2012
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Maeli Dal Pai
• Beneficiário: Luana Campos Soares
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Biologia celular Insuficiência cardíaca Expressão gênica Junção neuromuscular Músculo do diafragma Treinamento aeróbio Caracterização estrutural Microscopia confocal Western blotting Análise estrutural
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Insuficiência Cardíaca | junçao neuromuscular | Musculo Astriado Esquelético | Treinamento Aeróbico | Área da Saúde

Resumo

A insuficiência cardíaca (IC) é uma síndrome caracterizada pela redução da função cardíaca e ativação de mecanismos compensatórios no organismo. Os sintomas mais comuns são fadiga muscular e dispnéia, além de mudanças dos tipos de fibras musculares de lentas para rápidas, atrofia e aumento na expressão dos receptores nicotínicos de acetilcolina (nAChR) na junção neuromuscular (JNM). A ativação e a estabilidade dos nAChR ocorre pela interação de fatores tróficos com proteínas do sarcolema da fibra muscular. O músculo diafragma é acometido pela IC e o treinamento físico é considerado uma conduta amplamente aceita para minimizar as consequências dos sintomas causados pela IC. A hipótese deste trabalho é que na IC, o aumento da expressão dos nAChRs está associado à alterações na liberação de fatores tróficos que atuam na expressão de proteínas do sarcolema, levando à mudanças nas características morfológicas das JNMs no músculo diafragma. Além disso, o exercício físico minimiza as alterações nas JNMs e as características morfofuncionais do músculo. O objetivo deste trabalho será avaliar a expressão gênica e protéica do fator trófico agrina e das proteínas do sarcolema rapsina e musk; bem como a caracterização e análise estrutural das JNMs no músculo diafragma de ratos com IC, submetidos ao treinamento aeróbico. Serão utilizados 112 ratos Wistar machos (90 a 100g), divididos em quatro grupos: Controle (C), Estenose Aórtica (EAo - inserção de um clip de prata com 0.6 mm de diâmetro na aorta ascendente), Treinado (TR), Estenose Aórtica com Treinamento (EAoTR). Após 18 semanas da cirurgia de indução da EAo, parte dos animais controle e com EAo serão aleatoriamente divididos em treinados ou não. Os animais serão submetidos ao treinamento aeróbico em esteira por 10 semanas (5dias/semana). Os parâmetros clínicos da IC serão avaliados. A expressão gênica e protéica do fator trófico Agrina e das proteínas do sarcolema da fibra muscular musk e rapsina serão analisadas por PCR em Tempo Real e Western Blot, respectivamente, e a caracterização estrutural das JNMs será realizada por microscopia confocal de varredura a laser. Os dados serão submetidos à análise estatística apropriada. (AU).