Efeitos de diferentes meios de cultivo, temperaturas e tempos de refrigeração sobre a viabilidade e expressão gênica de embriões bovinos produzidos in vitro

• Processo: 13/15905-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2014
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2015
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Eunice Oba
• Beneficiário: Fernanda Nunes Marqui
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Expressão gênica Embrião de animal Bovinos Fertilização in vitro animal
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: embrião | meios de cultivo | Refrigeração | Temperatura | Biotécnicas da Reprodução

Resumo

O presente trabalho tem como objetivo verificar os efeitos de diferentes meios de cultivo, temperaturas e tempos de refrigeração sobre o desenvolvimento e qualidade de embriões bovinos produzidos in vitro. Os seguintes experimentos serão realizados: exp.1, embriões cultivados em meio m-SOF nas temperaturas de 5°C (por 24 e 48 horas) e 25°C (24 horas; controle); exp. 2, embriões cultivados em meio BotuEmbryo® nas temperaturas de 5°C (por 24 e 48 horas), 25°C (24 horas) e o melhor resultado do exp. I.; exp. 3, embriões cultivados em meio Syngro® nas temperaturas de 5°C (por 24 e 48 horas), 25°C (24 horas) e o melhor resultado do exp. II. Os oócitos, obtidos a partir de ovários de vacas sacrificadas em frigorífico, serão selecionados em meio de maturação base MM-b. Grupos de 20 a 25 oócitos/gota serão maturados em MM-b acrescido de FSH e LH. A seleção espermática será realizada em gradiente descontínuo de Percoll, utilizando o meio TALP suplementado com PHE e heparina para Fertilização in Vitro (FIV). A Cultura dos Embriões in Vitro (CIV) será feita em meio SOF modificado; as etapas MIV, FIV e CIV serão efetuadas em incubadora de CO2 a 5%, em ar, a 38,7°C e alta umidade. Ao dia 7 pós-inseminação os blastocistos serão aleatoriamente transferidos para os grupos de tratamento. As taxas de expansão (24h) e de eclosão (48h), assim como o Número Total de Células (NTC) e a expressão dos genes SOD1, AOP-1, Hsp 70.1 e survivin serão avaliados após os respectivos períodos de refrigeração. ANOVA e teste T de Bonferroni serão empregados para análise de diferenças entre os grupos para o desenvolvimento embrionário, número total de células e proporção de células vivas e mortas. Os resultados de expressão gênica serão analisados através do teste de x2. Diferenças de P<0,05 serão consideradas como significativas. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

MARQUI, FERNANDA N.; MARTINS, JR., ALICIO; CARDOSO, TEREZA C.; CRUZ, TAIRINI E.; DELL'AQUA, JR., JOSE ANTONIO; OBA, EUNICE. Cooling of in vitro-produced bovine embryos: Effects of medium and time on gene expression, DNA fragmentation and embryonic survival. LIVESTOCK SCIENCE, v. 230, DEC 2019. (13/15905-9)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

MARQUI, Fernanda Nunes. Efeitos de diferentes meios e tempos de refrigeração sobre a viabilidade gênica de embriões produzidos in vitro. 2015. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia. Botucatu Botucatu.