Solubilização de membranas modelo de diferentes composições pelo detergente Triton X-100

• Processo: 13/20499-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2014
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2015
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Karin Do Amaral Riske
• Beneficiário: Bruno Mattei
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Solubilização Calorimetria Detergentes Termodinâmica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: calorimetria | detergentes | Membranas Modelo | Solubilizacao | Biofísica de Membranas

Resumo

Detergentes são moléculas anfifílicas amplamente utilizadas como agentes solubilizadores de membranas biológicas. No entanto, membranas biológicas tratadas com detergentes apresentam fragmentos insolúveis ricos em esfingolipídios e colesterol. Devido a semelhanças de composição e característica, esses fragmentos têm sido associados aos lipid rafts e à fase líquido-ordenada. Aqui é proposto o estudo de aspectos físico-químicos que regem o processo de solubilização de modelos miméticos da membrana: vesículas lipídicas de composição controlada (misturas binárias e ternárias, principalmente dos lipídios POPC, SM e colesterol). Diferentes técnicas serão utilizadas para estudar o processo de solubilização de vesículas lipídicas pelo detergente TX-100, um dos detergentes mais empregados em protocolos de solubilização de membranas biológicas. Os aspectos termodinâmicos da interação detergente-lipídio serão investigados por calorimetria de titulação isotérmica; o tamanho das estruturas formadas durante a solubilização será obtido por turbidez, espalhamento de luz estático e/ou dinâmico; o processo de solubilização de vesículas gigantes será avaliado por microscopia óptica; a possível interferência do detergente na transição de fase dos lipídios será investigada por calorimetria diferencial de varredura e a capacidade dos detergentes de permeabilizar a membrana será investigada por cinética de vazamento de uma sonda fluorescente. O projeto investigará diferentes composições lipídicas a fim de obter informações sobre os fatores que influenciam a obtenção de fragmentos insolúveis de membrana. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

MATTEI, BRUNO; LIRA, RAFAEL B.; PEREZ, KATIA R.; RISKE, KARIN A.. Membrane permeabilization induced by Triton X-100: The role of membrane phase state and edge tension. Chemistry and Physics of Lipids, v. 202, p. 28-37, JAN 2017. (13/20499-0, 11/22171-6)