Relevância da proteína IMPACT na regulação do metabolismo

• Processo: 14/07850-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2014
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2015
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Beatriz Amaral de Castilho
• Beneficiário: Rafael Calil
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 09/52047-5 - Regulação traducional mediada por EIF2 em eucariotos, AP.TEM
• Assunto(s): Proteínas Fosforilação Metabolismo Hipotálamo Consumo de alimentos Ganho de peso
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: eIF2 | Gcn2 | Impact | Regulação traducional | Síntese Protéica | Regulação traducional

Resumo

O controle traducional mediado pela fosforilação do fator de início de tradução 2 (eIF2) é fundamental para a adaptação celular frente a várias condições de estresse, e defeitos nesta sinalização levam a condições patológicas importantes no homem. Uma das 4 quinases de eIF2 em mamíferos, GCN2, regula a expressão de uma complexa rede de genes em resposta, por exemplo, à falta de amino ácidos. GCN2 determina o comportamento frente a fonte de amino ácidos e modula a memória hipocampal. Em trabalhos anteriores, mostramos que a proteína IMPACT em mamíferos é um inibidor de GCN2, ligando-se a GCN1, proteína efetora de GCN2, semelhantemente a Yih1, seu ortólogo em levedura. IMPACT é preferencialmente expressa em neurônios, e abundante no hipotálamo. Este grupo tem realizado estudos moleculares sobre essa proteína especialmente no que concerne a interações com outras moléculas. Adicionalmente, utilizando camundongos desprovidos dessa proteína (IMPACT-KO), estamos buscando sua relevância fisiológica. Em estudos anteriores, não foram observadas diferenças fenotípicas/comportamentais marcantes em animais IMPACT-KO relativamente a animais selvagens, nem tampouco testes bioquímicos de níveis de glicose e insulina mostraram diferenças muito significativas. No entanto, temos observado em nossas colônias que os animais desprovidos de IMPACT têm menor peso. Isto pode ser devido a alterações na sinalização hipotalâmica ocasionadas pela falta de IMPACT, talvez por levar a uma maior ativação de GCN2. Este projeto tem como objetivo o estudo da relevância da proteína IMPACT na fisiologia animal. Especificamente, serão avaliados o ganho de peso e o consumo alimentar de animais IMPACT-KO, comparados com isogênicos selvagens, submetidos a dieta hiperlipídica ou de aumento de carbohidratos por 2 meses, e avaliar os níveis de glicose, insulina e leptina circulantes após esse período. Pretende-se ainda avaliar a resposta dos animais knock-out, mantidos em ração normal, à administração intracerebro ventricular de leptina. Complementando esse estudo, no final desses experimentos serão avaliadas as vias de sinalização da leptina no hipotálamo, por meio de immunoblots. Este trabalho será realizado com a colaboração de Dr. Marcelo Mori (Depto. Biofísica, EPM) e Dra. Beatriz Longo (Depto. Fisiologia, EPM).