Modular hipertermoestável endo-beta-1,4-mananase: determinação da estrutura tridim...
- Auxílios pontuais (curta duração)
| Processo: | 14/02065-5 |
| Linha de fomento: | Bolsas no Brasil - Doutorado |
| Vigência (Início): | 01 de agosto de 2014 |
| Vigência (Término): | 31 de março de 2018 |
| Área do conhecimento: | Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular |
| Convênio/Acordo: | Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) |
| Pesquisador responsável: | Wanius José Garcia da Silva |
| Beneficiário: | Viviam Moura da Silva |
| Instituição-sede: | Centro de Ciências Naturais e Humanas (CCNH). Universidade Federal do ABC (UFABC). Ministério da Educação (Brasil). Santo André , SP, Brasil |
| Bolsa(s) vinculada(s): | 16/15836-5 - Modular hipertermoestável endo-beta-1,4-mananase: determinação da estrutura tridimensional do domínio central e seu papel na termoestabilização global da enzima, BE.EP.DR |
| Assunto(s): | Cristalografia de raios X |
Resumo A enzima hipertermófila endo-beta-1,4-mananase de Thermotoga petrophila (TpMan) catalisa a hidrólise de ligações glicosídicas beta-1,4 em inúmeros polissacarídeos contendo manana. A biodegradação da manana representa uma etapa chave para várias aplicações industriais incluindo a deslignificação da polpa kraft, processamento de alimentos e produção de biocombustíveis de segunda geração. Um recente estudo mostra que a enzima TpMan consiste de um domínio catalítico GH5 e um domínio de ligação ao carboidrato CBM27 conectados através de um linker. O mesmo estudo apresenta a estrutura cristalográfica do domínio catalítico GH5, contudo, até o momento, não há uma estrutura tridimensional determinada por métodos experimentais disponível para a enzima TpMan completa. Em um recente estudo, nosso grupo de pesquisa demostrou que o linker possui uma estrutura compacta e ocupa um pequeno volume considerando seu grande número de resíduos de aminoácidos. Além disso, a deleção do linker mais o domínio CBM27 reduziu a termoestabilidade do domínio catalítico GH5. Assim, os objetivos principais deste projeto de Doutorado são: I) determinar a estrutura tridimensional do domínio central (linker) e; II) elucidar e caracterizar o seu papel na termoestabilização global da enzima. Com tal intuito, as estruturas tridimensionais de alta resolução dos domínios central (linker) e C-terminal CBM27 serão determinadas através da técnica de cristalografia de raios X empregando monocristais de proteína. Além disso, as estabilidades térmicas de cada domínio serão analisadas através de técnicas biofísicas e comparadas com a enzima completa. (AU) | |