Caracterização da quitinase das espécies de Leishmania endêmicas da América do Sul: utilização no diagnóstico em humanos, cães e flebotomíneos.

Resumo

A leishmaniose é uma doença infecciosa negligenciada em expansão na América do Sul, incluindo o Brasil, causada por parasitas do gênero Leishmania, classe Kinetoplastida e família Trypanosomatidae. Há mais de 30 espécies de Leishmania sendo que destas, 20 causam doença em humanos em diferentes partes do mundo. A transmissão do protozoário ocorre em ciclos difásicos por insetos vetores da Família Psycodidae (flebotomíneos), gêneros Phlebotomus (no Velho Mundo) e Lutzomyia (no Novo Mundo - Américas), aos humanos, cães domésticos e animais silvestres. A apresentação clínica desta doença depende da espécie do parasita e da resposta imunológica do hospedeiro, sendo variável, com um espectro que vai desde indivíduos e animais assintomáticos; lesões tegumentares (LT), as quais podem ser cutâneas e mucocutâneas com sequelas desfigurantes e incapacitantes; e a forma visceral (LV) que é a mais grave já que se não for tratada corretamente, pode levar ao óbito. Na América do Sul, a espécie causadora da LV é a L. infantum chagasi, enquanto que a LT é principalmente causada pelas espécies L. braziliensis, L. amazonensis, L. guyanensis, L. naiffi, L. shawi e L. lainsoni. Cada espécie de Leishmania é transmitida por vetores específicos. A ineficácia dos atuais métodos de controle e tratamento das leishmanioses está relacionada à dificuldade em diagnosticar e identificar as espécies de Leishmania em circulação. A identificação correta das espécies de Leishmania é fundamental para o tratamento de humanos e manejo adequado dos reservatórios animais, sobretudo em áreas endêmicas para várias espécies do parasita, além de outros tripanossomatídeos, o que resulta em reações cruzadas em testes de diagnósticos. Estudo prévio realizado por nosso grupo de pesquisa demonstrou que o gene que codifica a quitinase de L. i. chagasi apresentou alta sensibilidade e especificidade no diagnóstico desta espécie de Leishmania em amostras humanas. A especificidade de sequencia de nucleotídeos e aminoácidos da quitinase nas diferentes espécies de Leishmania, a expressão da proteína nos estágios de desenvolvimento do parasita dos hospedeiros vertebrado e invertebrado, e a exportação para o meio extracelular, apoiam a hipótese de que a quitinase de Leishmania constitui-se em excelente ferramenta para o diagnóstico molecular e também para pesquisa de anticorpos específicos produzidos para cada espécie do parasita. Portanto este projeto tem por objetivo utilizar o gene que codifica a quitinase como alvo no diagnóstico molecular das espécies de Leishmania endêmicas da América do Sul, em humanos, cães e flebotomíneos. Formas recombinantes da proteína serão utilizadas em testes de diagnóstico sorológico de diferentes espécies de Leishmania em humanos e cães. (AU)