Estudo do papel funcional e molecular das Nek7 e Nek10 na regulação da divisão celular associada ao câncer

• Processo: 14/06873-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2014
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2017
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Acordo de Cooperação: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
• Pesquisador responsável: Jörg Kobarg
• Beneficiário: Edmarcia Elisa de Souza
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 16/07815-8 - Implicações funcionais e moleculares da Nek10 humana na função do centrossomo, BE.EP.PD
• Assunto(s): Ciclo celular Neoplasias
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: câncer | ciclo celular | onco-proteína | proteína reguladora | proteína sinalizadora | Quinase | Sinalização

Resumo

O ciclo celular é um complexo e bem orquestrado processo que culmina na divisão celular, quando conjuntos de cromossomos duplicados são igualmente particionados entre duas células filhas. O aparato do fuso mitótico é composto de redes de microtúbulos ligados aos cinetocoros e organizados a partir de dois centrossomos que medeiam a adequada congressão dos cromossomos. A sinergia dos eventos de formação do fuso mitótico e centrossomos é essencial para a divisão celular adequada e sua desregulamentação resulta em fenótipos característicos de cânceres humanos. As proteínas quinases Neks humanas são essenciais para a progressão da divisão celular e por isso têm recebido atenção em terapia do câncer. No entanto, o potencial de Neks como alvos para terapia do câncer é relativamente inexplorado principalmente porque estudos limitados em relação a suas funções foram realizados. Nossos trabalhos anteriores têm demonstrado que Nek7 e Nek10 são localizadas no centrossomo, fuso mitótico, e pólo do fuso durante a metáfase; fuso central durante anáfase; ponte citoplasmática e midbody durante a citonese. Além disso, nossos estudos de proteômica mostram que a Nek7 e Nek10 interagem com proteínas que contribuem para os essenciais processos de divisão celular. Neste trabalho de pós-doutoramento, nós vamos explorar os potenciais papéis moleculares e funcionais de Nek7 e Nek10 na regulação de mecanismos de divisão celular com foco nas funções do centrossomo e fuso mitótico. Para este fim, mutantes knockdown e células superexpressando as formas selvagem, quinase dead e fosfomimética da Nek7 e Nek10 serão gerados e os seus fenótipos morfológicos, estruturais e de dinâmica da divisão celular serão avaliados usando microscopia de fluorescência de alta resolução combinada com time-lapse image. Além disso, ensaios de nucleção de microtúbulos a partir de centrossomos purificados, combinados com análises de Western Blotting serão realizados a fim de se obter uma prova direta e os mecanismos moleculares das funções Nek7 e Nek10 no centrossomo e fuso mitótico. Esta pesquisa irá contribuir grandemente para a compreensão do papel das Nek7 e Nek10 na regulação do centrossomo e do fuso mitótico durante a divisão celular. Em resumo, além da relevância da compreensão dos potenciais papéis das Neks na divisão celular para fins de investigação fundamental, espera-se que as Neks sejam indicadas como potenciais alvos terapêuticos para o tratamento do câncer. (AU)