Análise do fenótipo epididimário de camundongos com alterações genéticas que afetam o desenvolvimento do ducto de epididimário

• Processo: 14/23382-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Pesquisa
• Data de Início da vigência: 02 de março de 2015
• Data de Término da vigência: 01 de setembro de 2015
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
• Pesquisador responsável: Raquel Fantin Domeniconi
• Beneficiário: Raquel Fantin Domeniconi
• Pesquisador Anfitrião: Barry Thomas Hinton
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: University of Virginia (UVa), Estados Unidos
• Assunto(s): Fertilidade Desenvolvimento Reprodução
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: desenvolvimento | fertilidade | Segmento inicial epidídimo | Biologia da Reprodução

Resumo

Após transitar ao longo do ducto epididimário, os espermatozoides tornam-se capazes de fertilizar um ovócito. A morfogênese tubular é processo fundamental durante a formação do epidídimo e a sobrevivência dos mamíferos depende deste órgão ser totalmente funcional. Assim, o alongamento e a morfogênese do duto de Wolffian devem ser coordenados a fim de proporcionar um ambiente adequado para a maturação do espermatozoide. A capacitação dos espermatozoides depende da modulação de proteínas por cascatas de fosforilação e desfosforilação, estudos recentes têm demonstrado que a família de quinases Src desempenha papel importante na regulação desses eventos. Os espermatozoides de camundongos cSrc Knockout apresentam severa redução na motilidade e são incapazes de fertilizar um ovócito. Estudos preliminares, conduzidos pelo grupo de pesquisa do Dr Hinton, sugerem que Src desempenha papel no desenvolvimento do epidídimo. Portanto, o objetivo deste projeto será analisar o fenótipo do epidídimo de ratos que carregam uma mutação de um inibidor da SRC, CSK (c-SRC tryrosine quinase). Os camundongos knockout serão gerados, sendo o CSK removido das células epiteliais do segmento inicial do epidídimo, durante o desenvolvimento pós-natal. O segmento inicial foi escolhido, porque é crucial para a fertilidade masculina, assim, seria interessante para compreender os mecanismos que regulam o desenvolvimento e a função desta região epididimária. A análise do fenótipo do segmento inicial do epidídimo consistirá em: examinar a histologia do epitélio ao nível microscópico luz; examinar a expressão de componentes relacionados à via de sinalização da CSK, para detectar níveis de proteína, utilizando Western blot e imunofluorescência, e para detectar os níveis de mRNA utilizando RT-PCR e QPCR; e, realizar estudos de fertilidade.