O papel da O-GlcNAcilação (O-GlcNAc) no aumento da liberação de citocinas e na função cardiovascular de camundongos com Síndrome da Resposta Inflamatória Sistêmica (SIRS)

• Processo: 15/07683-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2015
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2016
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia
• Pesquisador responsável: Rita de Cassia Aleixo Tostes Passaglia
• Beneficiário: Marcos Augusto de Moura Marques
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Medicina Inflamação Função cardiovascular O-GlcNAcilação Citocinas Fator de necrose tumoral alfa Peptídeos e proteínas de sinalização intracelular Terapia intensiva
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Inflamação | O-GlcNAc | Síndrome da Resposta Inflamatória Sistêmica | Vascular | Medicina

Resumo

O processo de O-GlcNAcilação (O-GlcNAc) caracteriza-se pela adição de um açúcar simples [N-acetilglucosamina (GlcNAc)] ao complexo hidroxil (O) de resíduos de serina (Ser) e treonina (Thr) de proteínas nucleares e citoplasmáticas. O aumento da O-GlcNAc reduz a liberação de mediadores inflamatórios como interleucina-1² (IL-1²), interleucina-6 (IL-6) e fator de necrose tumoral alfa (TNF-±) bem como a ativação do fator nuclear kappa B (NF-ºB) em células do sistema imune. Na síndrome da resposta inflamatória sistêmica (SIRS, Systemic Inflammatory Response Syndrome), os eventos iniciais envolvem a ativação de células inflamatórias, aumento dos níveis de citocinas e da produção de espécies reativas de oxigênio (ERO). A hipótese do presente estudo é que o aumento da modificação por O-GlcNAc, após o início de SIRS, reduz os níveis de IL-1², IL-6 e TNF-±, ativação de NF-ºB, reduzindo as complicações cardiovasculares e os riscos de choque endotoxêmico. Como modelo experimental de SIRS utilizaremos camundongos submetidos à administração de lipopolissacarídeo (LPS) (endotoxemia). Os animais receberão injeções de glucosamina e/ou inibidor da enzima OGA - thiamet-G (os quais aumentam os níveis de proteínas modificadas por O-GlcNAc), ou veículo para determinação dos efeitos do aumento agudo de O-GlcNAc na sobrevida/mortalidade, na produção e liberação de citocinas por células inflamatórias e vasculares, na reatividade vascular e nas alterações de pressão arterial induzidas pela SIRS. A reatividade vascular será avaliada em anéis de aorta torácica e ramos da artéria mesentérica, e os níveis de citocinas/ativação de NF-kB serão determinados por ELISA e western blot. Dados preliminares do nosso laboratório demonstram que a administração prévia de glucosamina (antes da administração de LPS) atenua a liberação de medidadores inflamatórios e as alterações cardiovasculares observadas na SIRS. No presente projeto, testaremos os efeitos do aumento de O-GlcNAc, após a instalação da SIRS. Este estudo apresenta relevância científica, uma vez que a O-GlcNAc é considerada mecanismo adicional de controle da sinalização intracelular e pela SIRS representar uma patologia importante de causa de morte em pacientes hospitalizados em centros de terapia intensiva. Os estudos dos efeitos das modificações por O-GlcNAc são essenciais para o esclarecimento do papel desta modificação pós-traducional em situações fisiopatológicas como a SIRS. (AU)