Uso do sistema de armadilha óptica para avaliar o papel da proteína 14-3-3 de Drechmeria coniospora como adesina em Caenorhabditis elegans

• Processo: 15/14459-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 14 de novembro de 2015
• Data de Término da vigência: 13 de março de 2016
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Maria José Soares Mendes Giannini
• Beneficiário: Liliana Scorzoni
• Supervisor: Jonathan Ewbank
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Aix-Marseille Université (AMU), França
• Vinculado à bolsa: 13/10917-9 - Modelos animais alternativos: Virulência de diferentes espécies filogenéticas de Paracoccidioides e efeito das proteínas 43kDa e 30kDa e de seus anticorpos, BP.PD
• Assunto(s): Virulência
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Animais alternativos | C | elegans | Virulência | 14-3-3 protein | Micologia Clínica

Resumo

A interação fungos-hospedeiro é essencial para estabelecer a patogênese, nessa etapa participam moléculas envolvidas na adesão, também conhecidas como adesinas. Até o momento algumas adesinas foram identificadas em fungos patogénicos, para Paracoccidioides spp., são descritas a glicoproteína de 43 kDa, enolase, malato sintase, gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase, triosefosfato isomerase. A proteína de 30 kDa, que pertencente à família de proteínas é 14-3-3 tem se destacando como adesina deste fungo e pode ter um papel importante na paracoccidioidomicose. As proteínas da família 14-3-3 estão presentes em todos os eucariotos, são altamente conservado e têm a capacidade de se ligar a outras proteínas, resultando em ativação ou inibição de processos biológicos portanto, essas proteínas tem participação importante e complexa. Em Paracoccidioides spp.a proteína 14-3-3 tem sido descrita como uma adesina e sua expressão é maior em isolados com elevada taxa de adesão. Apesar de muitos anos de estudo de paracoccidioidomicose, a proteína 14-3-3 ainda não têm a sua ação elucidada na interação com o hospedeiro, além disso, devido a problemas éticos com o uso de mamíferos tornou-se necessário o desenvolvimento e aplicação de modelos animais alternativos. Caenorhabditis elegans é um nematóide amplamente utilizado como um modelo de infeção por diversos patógenos humanos importantes, na triagem para descoberta agente antifúngico e no estudo da imunidade inata. As limitações das metodologias convencionais em matéria de controle espacial e temporal entre o hospedeiro e o microrganismo gerou o desenvolvimento de técnicas de pinças ópticas para investigar interação patógeno-hospedeiro e a dinâmica do processo biológico. O uso de armadilhas ópticas ou pinças ópticas aparece cada vez mais na pesquisa biológica para capturar e manipular fisicamente células. Recentemente, o desenvolvimento de um sistema composto por pinças ópticas responsáveis para o movimento de vários objetos juntamente com um microscópio confocal para aquisição de imagem tridimensional permitem o estudo da interação de Drechmeria coniospora - C. elegans para investigar precisamente a adesão do fungo ao C. elegans. Neste contexto o sitema armadilhas ópticas acoplada a produção de imagem é uma tecnologia promissora para estudar a adesão e pode elucidar o papel de proteínas específicas como 14-3-3 usando o modelo de patógenos-hospedeiro in vivo. Além disso, a semelhança de sequência entre a proteína 14-3-3 D. coniospora e Paracoccidioides brasiliensis é de 79%, permitindo a utilização deste modelo bem estabelecido neste estudo. (AU)