Avaliação do mecanismo de luteólise em corpo lúteo cíclico e gestacional canino

• Processo: 15/23450-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 15 de março de 2016
• Data de Término da vigência: 10 de março de 2017
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Maria Denise Lopes
• Beneficiário: Ana Augusta Pagnano Derussi
• Supervisor: Bruce Daniel Murphy
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Université de Montréal, Canadá
• Vinculado à bolsa: 13/15358-8 - Função luteal no diestro cíclico e gestacional canino: uma abordagem celular do ponto de vista gênico e metabólico, BP.PD
• Assunto(s): Luteólise Fase luteal Corpo lúteo Esteroidogênese Cães
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: canine | corpora lutea | luteolysis | Fisiologia da Reprodução Animal

Resumo

Na espécie canina, o corpo lúteo (CL) gestacional e não-gestacional possuem características semelhantes, especialmente a partir da perspectiva esteroidogênica. O período de regressão luteal de ambos é considerado prolongado quando comparado a outras espécies comumente estudadas, fato que faz com que o entendimento do mecanismos luteolíticos sejam extremamente desafiadores nesta espécie. A fim de investigar a variação na expressão de genes relacionados com o processo de luteólise no final do diestro cíclico e gestacional, será avaliado o transcriptoma obtido pela técnica RNAseq e selecionados os principais mecanismos de expressão de genes relacionados com a luteólise em CL, que forem diferencialmente expressos entre os grupos propostos. Vamos validar os resultados através de qRT-PCR e imuno-histoquímica. Até o momento, realizamos o monitoramento do ciclo estral e ováriohisterectomias nas fêmeas durante o diestro cíclico (grupo controle, n = 10) e gestacional (grupo experimental, n = 10). O CLS foram coletados em ambos os grupos entre os dias 40-44 (luteólise inicial) e 61-64 (luteólise final) após o surgimento do LH pré-ovulatório. Para analisar os perfis genéticos, o CLS serão submetidos à análise de RNA-seq e em seguida o transcriptoma será explorado através dos programas da plataforma e v.1.8.2 Galaxy, TopHat v.2.0.1, Bowtie v. 0.12.8 para mapeamento e análise de expressão diferencial e iremos alinha-los para o genoma canino. A validação da expressão gênica será realizada e para normalidade de variância e para comparações específicas usaremos ANOVA e Kruskal Wallis. Espera-se que um grande número de transcritos sejam expressos em ambos os grupos e que muitos sejam diferencialmente expressos entre os dois modelos. Vamos proceder a análise ontologia dos genes para estabelecer os caminhos e processos na regressão luteal. Esperamos que os principais receptores hormonais envolvidos no mecanismo de luteólise canino (LH-R, PRL-R, R PGF2±- e PGE2-R) sejam diferencialmente expressos entre os grupos propostos. Nos propomos a validar estes e outros alvos por qPCR e imuno-histoquímica no CRRA (Animal Reproduction Research Centre), com a supervisão do Professor Bruce Murphy. (AU)