Eliminação de células-alvo caspase-8 -suficientes e -deficientes por linfócitos T CD8+ antígeno-específicos

• Processo: 15/26396-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2016
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2018
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Celular
• Pesquisador responsável: João Gustavo Pessini Amarante Mendes
• Beneficiário: Isabella Suzuki Sampaio
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Apoptose Linfócitos T citotóxicos Proteína de domínio de morte associada a Fas Caspase 8 Linfócitos T CD8-positivos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: apoptosis | CASP8 mutation | cytotoxic T lymphocytes | death receptor pathway | resistance of tumor cells | Imunologia

Resumo

A direta eliminação de células-alvo por linfócitos T citotóxicos (CTLs) desempenha um papel importante na imunidade protetora contra patógenos e células tumorais, o que pode ser desencadeada pela ação de perforina e granzima, ou pelas interações Fas-FasL. A interação Fas-FasL promove a apoptose por meio da formação de DISC (death-inducing signaling complex), que é um complexo composto pela cauda citoplasmática de Fas, a proteína adaptadora FADD e a pro-caspase-8 apical. Nesse complexo, a caspase-8 é ativada e desencadeia o sinal apoptótico por meio da clivagem das caspases efetoras- caspase-3, -6 e -7, e/ou Bid - membro da família Bcl-2. A deficiência na caspase-8 tem sido associada à síndrome autoimune linfoproliferativa (ALPS). Recentemente, tem sido demonstrado uma correlação entre mutações no gene CASP8 de células tumorais de pacientes com alta atividade citolítica, sugerindo que a deficiência em caspase-8 pode representar um mecanismo pelo qual células tumorais evadem da sinalização apoptótica desencadeada por CTLs. Nosso grupo tem utilizado o adenovírus recombinante humano tipo 5 (hAd5) para estudar respostas imunes in vivo mediadas por células T citotóxicas. Para avaliar a resposta gerada por CTLs, camundongos imunizados ou não-imunizados recebem, por via intravenosa, esplenócitos singênicos marcados com fluorescências diferentes e pulsados (alvo) ou não pulsados (controle) com peptídeos específicos, misturados na razão 1:1. A eliminação específica das células-alvo é avaliada através da análise da citometria de fluxo dos esplenócitos após 18-24h. Para investigar o papel relativo de caspase-8 na resistência de células-alvo à eliminação in vivo por linfócitos T citotóxicos, esplenócitos caspase-8- suficientes (selvagem) e -deficientes e linhagens celulares serão utilizados como alvo nesse sistema. Além disso, camundongos selvagens, perforina -/- e FasL-deficientes serão imunizados a fim de avaliar a relativa contribuição de diferentes vias apoptóticas. Portanto, esse projeto contribuirá para a compreensão do papel da caspase-8 na resistência de células tumorais à eliminação in vivo por linfócitos T citotóxicos. (AU)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

SAMPAIO, Isabella Suzuki. Eliminação antígeno-específica de células-alvo caspase-8 - suficientes ou - deficientes por linfócitos T CD8+. 2018. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Instituto de Ciências Biomédicas (ICB/SDI) São Paulo.