Sinergismo do trimetafosfato de sódio e da proteína da matriz dentinária-1 (DMP-1) na dentina desmineralizada como estratégia biomimética

• Processo: 16/06869-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 29 de agosto de 2016
• Data de Término da vigência: 29 de setembro de 2016
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Materiais Odontológicos
• Pesquisador responsável: Linda Wang
• Beneficiário: Rafael Simões Gonçalves
• Supervisor: Ana Karina Barbieri Bedran-Russo
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: University of Illinois at Chicago (UIC), Estados Unidos
• Vinculado à bolsa: 15/02559-0 - O uso de TMP sobre enzimas endógenas dentinárias e na biomimetização do substrato dentinário desmineralizado, BP.DR
• Assunto(s): Dentística Matriz dentinária Proteínas Biomimética Fosforilação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: biomimetic | chemical phosphorylation | Dentin | dentin matrix protein I | Dentística

Resumo

Proteínas da matriz dentinária-1 (DMP-1) são proteínas não colagênicas (PNC) que apresentam um importante papel durante a biomineralização dentária. Deste modo, uma hipótese seria que o uso do trimetafosfato de sódio (STMP) associado com proteínas DMP-1 poderia induzir a biomineralização da dentina desmineralizada. No presente estudo, o efeito sinérgico do SMTP e DMP-1 na dentina desmineralizada como uma estratégia biomimética será sistematicamente investigada. Vinte e oito amostras de dentina (1,5mm x 3,0mm x 0,25mm) serão obtidas a partir da porção coronal de dez molares humanos. Todas as amostras serão desmineralizadas (14% de EDTA/10d), e, em seguida, tratadas com 1M NaCl e 0,25% de tripsina-EDTA para a remoção de proteínas endógenas não colagênicas. Um cenário de lesão de cárie extrema será criado por digestão de colagenases. As amostras de dentina serão distribuídas aleatoriamente em 4 grupos de acordo com sua estratégia de tratamento biomimético: G1- dentina desmineralizada sem PNC (DD-PNC); G2- DD-PNC + STMP 1,5% + Ca(OH)2; G3- DD-PNC + DMP-1; G4- DD-PNC + DMP-1 + STMP 1,5% + Ca(OH)2. Para o tratamento da matriz dentinária e nucleação, as amostras de dentina dos grupos G3 e G4 serão incubadas overnight com rDMP1 (150¼g/mL) em PBS. Após a incubação, as amostras serão enxaguadas com água deionizada e, amostras dos grupos G2 e G4 serão submetidas a um tratamento de fosforilação imergindo cada amostra em 50mL de STMP 1,5% + Ca(OH)2 durante 24 horas, cada uma das soluções, a 37ºC. Para determinar o papel do STMP na matriz de dentina sem ou com PNC, dezesseis amostras de dentina (n=4) serão criosseccionada (5µm de espessura) e preparadas para técnica histológica do tricrômico de Goldner e vermelho de alizarina, e submetidas à análise de nanodureza longitudinal e redução do módulo de elasticidade. Para verificar o efeito sinérgico do SMTP e DMP-1 em dentina desmineralizada, doze amostras de dentina (n=3) serão preparadas e avaliadas por nanodureza longitudinal, redução do módulo de elasticidade e TEM, para determinar a recuperação mecânica e padrão de mineralização. Os dados serão avaliados de acordo com sua distribuição para determinar os testes estatísticos mais adequados. (AU)