Validação do ensaio de cromatografia líquida de ultra alta eficiência acoplada a espectrometria de massa em dois estágios para quantificação de tacrolimo em matrizes de Linfócitos T (CD4+) e b do sangue periférico

• Processo: 16/10043-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2016
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2017
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Nelson Zocoler Galante
• Beneficiário: Nayara Duarte de Oliveira
• Instituição Sede: Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP (HCFMUSP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Nefrologia Imunossupressores Linfócitos T CD4-positivos Tacrolimo Sangue periférico Espectrometria de massas Cromatografia líquida de alta eficiência Estudos de validação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Agentes imunossupressores | espectrometria de massa | linfócitos B | Linfócitos T CD4 positivo | Monitoramento de drogas terapêuticas | tacrolimo | Nefrologia

Resumo

O monitoramento terapêutico de drogas imunossupressoras é utilizado com o objetivo de otimizar o balanço entre o efeito imunossupressor desejado e a toxicidade relacionada à exposição a níveis séricos excessivos. Mesmo sendo sistematicamente utilizado na prática clínica, uma parcela significativa dos receptores de transplante renal apresenta rejeição aguda do enxerto no primeiro ano de acompanhamento. Com o objetivo de aperfeiçoar o uso de drogas imunossupressoras, novas estratégias de monitoramento terapêutico estão atualmente em investigação. O monitoramento das concentrações de drogas imunossupressoras no interior dos linfócitos do sangue periférico é considerado uma abordagem promissora por constituir um indicador da disponibilidade do fármaco diretamente nas células do tecido alvo da imunossupressão. A cromatografia líquida de ultra alta eficiência acoplada a espectrometria de massa em dois estágios (UPLC-MS/MS) constitui metodologia apropriada para o monitoramento de concentrações de drogas imunossupressoras no interior dos linfócitos pois permite quantificações precisas de drogas em pequenas concentrações em amostras de material biológico de volumes muito pequenos. Este estudo tem por objetivo otimizar as condições técnicas e determinar parâmetros de validação do ensaio de UPLC-MS/MS para quantificação de tacrolimo separadamente em matriz de PBMC, de linfócitos T CD4+ e de linfócitos B do sangue periférico.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ROMANO, PASCHOALINA; FERNANDES, MARIA DA LUZ; REZENDE EBNER, PERSIO DE ALMEIDA; DE OLIVEIRA, NAYARA DUARTE; OKUDA, LARISSA MITSUE; AGENA, FABIANA; MENDES, MARIA ELIZABETE; SUMITA, NAIRO MASSAKAZU; COELHO, VERONICA; DAVID-NETO, ELIAS; et al. UPLC-MS/MS assay validation for tacrolimus quantitative determination in peripheral blood T CD4+and B CD19+lymphocytes. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, v. 152, p. 306-314, APR 15 2018. (16/10083-9, 16/10043-7, 15/11389-1)